社区和医院环境对鼻腔耐甲氧西林金黄色葡萄球菌定植影响研究.docxVIP

社区和医院环境对鼻腔耐甲氧西林金黄色葡萄球菌定植影响研究 　　摘要：目的：了解社区和医院两种不同环境对鼻腔耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（mrsa）定植的影响。方法：用鼻拭子法采集108例未进入临床实习医学生和99例正进行临床实习医学生鼻腔样本，用金黄色葡萄球菌显色培养基培养筛查金黄色葡萄球菌，并通过pcr方法检测sccmeca基因，进行mrsa的鉴定。比较两个群体中mrsa携带率的差异，分析社区和医院环境对mrsa在人鼻腔定植的影响。结果：108例未进入临床实习医学生共检出金黄色葡萄球菌（sau）菌株44例，mrsa菌株8例，mrsa检出率7%，99例进入临床实习医学生共检出sau菌株59例，mrsa菌株21例，mrsa检出率21%。实习组mrsa携带率是未实习组的2.86倍，两种不同环境下造成的mrsa阳性率不同具有统计学意义（χ2=8.171，p0.05）。结论：社区和医院两种不同环境对鼻腔耐甲氧西林金黄色葡萄球菌定植有显著影响，长期处于医院环境可使鼻腔mrsa定值率显著提高。 　　关键词：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌;鼻拭子;社区;医院 　　中图分类号：c915文献标志码：a文章编号：1674-9324（2020）01-0110-02 　　金黄色葡萄球菌（sua）是常見病原菌之一，由于抗菌药物的大量使用，耐甲氧西林金黄色葡萄球（mrsa）的感染率不断攀升[1，2]，严重威胁到患者的生命安全，成了临床治疗的一大难题[3]。本研究通过采集处于医院和社区环境中健康医学生群体鼻拭子样本，进行金黄色葡萄球菌和mrsa的培养与鉴定，研究不同环境因素对mrsa在人群鼻腔定植的影响。 　　一、资料与方法 　　1.样本采集。收集处于医院环境（湖北文理学院附属医院）的临床实习生的鼻拭子样本99例，同时收集未进入临床的在校生学生鼻拭子样本108例，以上样本均为来自不同个体的非重复性样本，同时选取atcc25923和atcc43300作为sau和mrsa阳性对照菌株。 　　2.金黄色葡萄球菌分离培养。按试剂盒要求配制金黄色葡萄球菌显色培养基（chromagartm法国科玛嘉），对鼻拭子样本进行sau的分离培养，37℃，恒温培养48小时，红色或粉红色菌落为金黄色葡萄球菌，并挑出保存。 　　3.mrsa菌株鉴定。将筛选金黄色葡萄球菌接种至哥伦比亚血琼脂平板，37℃，恒温培养24小时。利用ezup柱式细菌基因组dna抽取试剂盒（上海生工）提取基因组，通过taqpcr扩增试剂盒（上海生工）对提取基因组进行sccmeca基因扩增，进行mrsa菌株的鉴定[4]。扩增引物为：forward：5’-tccagattacaacttcacc- 　　agg-3’;reverse：5’-ccacttcatatcttgtaacg-3’。扩增体系为：模板3μl，引物2μl，2×mastermix10μl，ddh2o5μl。扩增条件为：95℃4min;95℃45s，45℃45s，72℃60s;30循环，72℃5min。将扩增产物在2%琼脂糖凝胶电泳检测中扩增条带。 　　4.统计分析。利用spss17.0对两个群体sa和mrsa的检出率进行统计，分析社区和医院环境对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（mrsa）对人鼻腔定植的影响。 　　二、结果 　　1.菌株分离培养。在金黄色葡萄球菌固体显色培养基上长出的红色或粉红色菌落为sau，从99例临床实习组样本中筛检出sau59例，108例未进入临床组中筛检出sau44例。图1为两例在显色培养基上分离培养的sau菌株。 　　1：临床实习组样本分离sau菌株;2：未进入临床组样本分离sau菌株。 　　2.mrsa基因检测。对分离sau菌株提取基因组，进行琼脂糖凝胶电泳检测，如图2所示。提取分离sau菌株基因组，进行sccmeca基因扩增，琼脂糖凝胶电泳检测以鉴定mrsa菌株。未进入临床实习组44例sau中检出mrsa菌株8例，临床实习组59例sau中检出mrsa菌株21例。图3所示为mrsa菌株sccmeca基因扩增电泳检测结果，基因组能扩增出162bp的目的片段。 　　3.统计分析。从99例临床实习组学生样本中共检出金黄色葡萄球菌（sau）59例，检出率为59.6%;108例未进入临床组学生样本共检出金黄色葡萄球菌（sau）样本44例，检出率为40.7%。临床实习组sau阳性率是未进入临床组样本的1.463倍，两组间具有统计学意义（χ2=7.346，p0.05）。从99例临床实习组学生样本中共检出mrsa21例，检出率为21.2%;从108例未进入临床组学生样本检共出mrsa8例，检出率为7.4%。临床实习组mrsa阳性率是未进入临床