高效液相色谱法测定双葛止泻口服液中绿原酸的含量.docxVIP

高效液相色谱法测定双葛止泻口服液中绿原酸的含量 　　摘要[目的]建立并验证双葛止泻口服液中绿原酸的含量测定方法。[方法]采用agilentzorbaxsb-c18（150mm×4.6mm，5μm），流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱;检测波长为327nm;流速为1.0ml/min;柱温为25℃。[结果]绿原酸进样量在0.0825～0.8250μg与峰面积呈良好的线性关系（r=0.9999），平均回收率为104.0%，rsd为0.4%。[结论]该方法简便、准确、专属性强，可用于双葛止泻口服液中绿原酸的质量控制。 　　关键词绿原酸;双葛止泻口服液;高效液相色谱法 　　中图分类号r286文献标识码a 　　文章编号0517-6611（2019）10-0167-03 　　abstract[objective]themethodfordeterminationofthecontentofchlorogenicacidinshuanggeantidiarrheaoralliquidwasdevelopedandvalidated.[method]theanalysiswasperformedonanagilentzorbaxsbc18column（150mm×4.6mm，5μm）.thegradientmobilephasewasconsistedofacetonitrile-0.4%phosphoricacidsolution，andthedetectionwavelengthwas327nm.theflowratewas1.0ml/minandthecolumntemperaturewas25℃.[result]thelinearrangeofthecalibrationcurvesforchlorogenicacidwas0.0825-0.8250μg（r=0.9999），andtheaveragerecoverywas104.0%withrsdof0.4%.[conclusion]themethodissimpleandaccuratewithhighspecificity，whichcanbeusedtodeterminethecontentofchlorogenicacidinshuanggeantidiarrheaoralliquid. 　　keywordschlorogenicacid;shuanggeantidiarrheaoralliquid;hplc 　　雙葛止泻口服液是由金银花、葛根、黄芩等6味中药采用现代提取工艺，经离心纯化，加入辅料，灭菌而制成的口服液制剂。临床试验结果表明，本方具有清热燥湿、解毒止泻的功效，可用于仔猪湿热泄泻。本方是在中医古籍《伤寒论》中经典方剂“葛根芩连汤”的基础上，通过组方加减、工艺优化、剂型改进而制成的中兽药制剂。金银花为本方的君药，性甘寒，具有清热解毒、疏散风热的功能。现代研究表明，金银花具有解热、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗凝血等药理作用，其中绿原酸是金银花中的主要功效成分[1-5]。 　　由于该制剂为中兽药复方新制剂，目前尚无质量标准，为了更好地控制该制剂的质量，笔者采用高效液相色谱梯度洗脱法，建立双葛止泻口服液中绿原酸的含量测定方法，并对该方法进行耐用性研究，以期为该制剂的质量控制提供依据。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　1.1.1主要仪器。waterse2695型高效液相色谱仪，配2489型紫外检测器（美国waters公司）;ab135-s型电子分析天平（瑞士梅特勒托利多公司）。 　　1.1.2试药与试剂。绿原酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号110753-201415，含量96.2%）、双葛止泻口服液（洛阳惠中兽药有限公司，批20170202规格：每1ml相当于原生药0.45g）;乙腈，hplc级，thermofisherscientific公司;磷酸，hplc级，天津市科密欧化学试剂有限公司;水为超纯水。 　　1.2方法 　　1.2.1 　　色谱条件与系统适用性。色谱柱：agilentzorbaxsb-c18（150mm×4.6mm，5μm）;梯度洗脱，流动相：乙腈-0.4%磷酸溶液（0～12min，乙腈11%;12～13min，乙腈由11%上升至40%;13～18min，乙腈40%;18～19min，乙腈由40%下降至11%;19～25min，乙腈11%），流速1.0ml/min;柱温25℃;检测波长327nm;进样量10μl。理论板数按绿原酸峰计算应不低于1000。 　　1.2.2对照品贮备液