鱼类多倍体育种技术及应用.pptVIP

异源四倍体是可育的，而不加倍的（AB）可能是杂种不育。 异源四倍体或是同源四倍体，也具有可育性）。 （AA） （BB） （AABB） × （AAAA） × （BBBB） （AABB） 异源多倍体：染色体组内容不相同，来自不同物种 也称双二倍体。 （AA） × （BB） （AB） + （ AB） 第30页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 鱼类的远缘杂交可能产生单倍体、二倍体和多倍体(Chevassus 1983)。 用雌性草鱼(2n=48)与雄性三角鲂(2n=48)杂交，获得子一代染色体数目为72的草鲂杂种三倍体(刘思阳 1987) 。 第31页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 用异育银鲫与兴国红鲤杂交获得复合四倍体(种间杂交)，第二极体排放受到抑制从而产生多倍体，而种内杂交很少有不排出第二极体的,其机理尚需进一步探讨； 第32页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 核移植诱导鱼类多倍体技术仍处于实验阶段，用四倍体的草鱼培养细胞的细胞核作为供体移植到泥鳅的去核卵内，获得心跳期的四倍体胚胎，该技术的成熟很可能成为诱导四倍体鱼类的有效途径之一 第33页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 细胞融合主要诱导鱼类囊胚细胞与囊胚细胞、囊胚细胞与未受精卵、囊胚细胞与受精卵或者受精卵与受精卵之间的细胞融合， 第34页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 但由于细胞内染色体发生重排，实际得到是含各种不同数量染色体的鱼类细胞群。 但利用这一技术可以探索改良品种的可能性。 第35页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 　2.2 物理学方法 主要包括 温度休克法 静水压法， 高盐高碱法 电休克法。 第36页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 物理学方法机制主要是通过破坏微管形成，使由微管蛋白聚合成的微管解体或阻止微管的聚合过程，使染色体失去移动的动力，人为抑制染色体向两极移动，形成多倍体细胞。 第37页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 2.2.1 温度休克法 即用略高于或略低于致死温度的冷或热休克来诱导三倍体(抑制第二极体排放)或四倍体(抑制第一次卵裂)的方法。 根据处理温度的高低分为热休克法和冷休克法。 一般冷水性鱼类如鲑科鱼类，通常用热休克，温度范围为28℃～36℃； 第38页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 温水性鱼类可以用热休克，也可用冷休克，温度范围为0℃~10℃左右。 鲤鱼用热休克可以获得较高比例的三倍体，香鱼三倍体的诱导用冷、热休克均可获得令人满意的结果。 第39页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 进行温度处理最重要的是必须确定 处理的开始时间 持续时间以及温度高低 鱼类温度休克敏感性的差异除了遗传背景外，还与卵子成熟度有关。 第40页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 美洲红点鲑卵受精后15min用28℃高水温热休克处理10min，可诱导出100%的三倍体，孵化率42%。 日本山口县外海水产试验场在水温15℃条件处理牙鲆受精卵4min，诱导出100%的三倍体牙鲆。 第41页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 实例： 日本学者1943年将受精后10分钟的鲤鱼卵用0.5－3℃处理10－30分钟可获得三倍体； 英国专家1972年对鲽鱼与川鲽杂交的受精卵（受精后15分钟）用0℃进行休克3.5小时，获得100%的三倍体并养成了成鱼。 第42页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 美国Valenti(1975)对奥里亚罗非鱼的受精卵进行冷休克处理，获得三倍体鱼。方法是将正在排卵的雌鱼捕出进行人工挤卵，加入精液，受精后14分钟后在11℃水温下处理1小时，再转入32℃条件下孵化成鱼苗，多倍体获得率为75%。 第43页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 水生所将受精后3分钟的鲤鱼卵用0－1.5℃的水温处理30分钟获得20－25%的三倍体。 草鱼与团头鲂杂种受精卵在有受精后5分钟在0－2℃下进行冷处理20分钟，获得57%的三倍体，还有14%的四倍体。 第44页，共82页，2022年，5月20日，1点22分，星期五 如果从受精后44分钟开始处理，持续时间26－34分钟，四倍体获得率为30－40%。 草鱼卵用相同的方法处理可获得30%左右的三倍体。 第45页