第4章第1节第3课时基因工程的基本操作程序.docxVIP

第3课时 基因工程的基本操作程序 课标内容要求 核心素养对接 阐明基因工程的基本操作程序 主要包括目的基因的获取、基因 表达载体的构建、目的基因导入 受体细胞和目的基因及其表达 产物的检测鉴定等步骤。 .科学思维——结合实例，采用 文字和图示方式说明基因工程 的基本操作程序。 .生命观念——运用结构与功 能观等观念理解PCR技术的过 程、原理、条件等。 一、利用表达载体构建重组DNA分子是基因工程操作的第二步 .克隆载体：用于大量扩增外源DNA的载体,称为克隆载体。 .表达载体：使目的基因既能扩增又能表达出相应蛋白质的载体,称为表 达载体。 .构建重组DNA分子:用同种限制性内切核酸酶剪切含有目的基因的DNA 片段以及表达载体,然后用DNA连接酶将它们连接起来,可完成体外重组，形 成重组的DNA分子。 二、将目的基因导入受体细胞是基因工程操作的第三步 .将目的基因导入细菌细胞 (1)感受态细胞：自然条件下，细菌的转化效率很低，通过化学和物理方法 的处理可以增强细菌捕获外源DNA的能力,成为感受态细胞。 (2)方法(以大肠杆菌为例)：将大肠杆菌放于低温、低浓度的CaCL溶液中, 造成细胞膨胀,细胞膜通透性改变，成为感受态细胞。再在低温条件下将大肠杆 菌与重组DNA分子混合,使外源DNA会附于受体细胞表面，最后进行短暂的 热刺激处理,使外源DNA转入细胞。 .将目的基因导入动物细胞 (