热原检查标准操作规程(2015版药典).pdfVIP

热原检查标准操作规程（2015 版药典） 1．目的： 通过本规程的制定，使该检查操作进一步规范化，标准化，以减少误差的发生。 2 ．依据： 《中国药典》2015 年版 四部 通则1142 P153 。 3 ．适用范围： 本标准适用于本公司有热原检查的操作。 4 ．责任： 热原QC 检验人员对本规程的实施负责。 5 ．程序： 5 ．1． 概述 本法系将一定剂量的供试品，静脉注入家兔体内，在规定时间内，观察家兔体温升 高的情况，以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。 5 ．2 ．实验材料及用具 5 ．2 ．1．天平（精度50g，家兔称重用）。 5 ．2 ．2 ．电热干燥箱（0~300 ±）℃ 5 ．2 ．3 ．恒温水浴箱（37~100 ）℃ 5 ．2 ．4 ．家兔固定盒 5 ．2 ．5 ．实验用具：注射器、针头、金属直镊、注射器盒、时钟、75 ％酒精棉球、 手术镊。 5 ．3 ．将供试品放入恒温水浴箱中，温热至约38℃。 5 ．4 ． 供试用家兔供试用的家兔应健康合格，体重 1.7kg 以上，雌兔应无孕。预测体 温前7 日即应用同一饲料饲养，在此期间内，体重应不减轻，精神、食欲、排泄等不得 有异常现象。未曾使用于热原检查的家兔；或供试品判定为符合规定，但组内升温达 0.6℃的家兔；或3 周内未曾使用的家兔，均应在检查供试品前7 日内预测体温，进行 挑选。挑选试验的条件与检查供试品时相同，仅不注射药液，每隔 30 分钟测量体温 1 次，共测8 次，8 次体温均在38.0~39.6℃的范围内，且最高与最低体温相差不超过0.4℃ 的家兔，方可供热原检查用。用于热原检查后的家兔，如供试品判定为符合规定，至少 应休息48 小时方可再供热原检查用，其中升温达0.6 ℃的家兔应休息2 周以上。对用于 血液制品、抗毒素和其他同一抗原性供试品检测的家兔可在5 天内重复使用1 次。如供 试品判定为不符合规定，则组内全部家兔不再使用。 5 ．5 ． 试验前的准备 5 ．5 ．1．用具的除热原：所有与药液接触的器具，都必须清洗干净后，置电热干 燥箱中经250℃、50 分钟加热除热原。注射器、针头、手术镊清洗干净后，放入注射器 盒内，密闭，放入电热干燥箱中经250℃，50 分钟加热除热原。 5 ．5 ．2 ．在作热原检查前1～2 日，供试用家兔应尽可能处于同一温度的环境中， 实验室和饲养室的温度相差不得大于3℃，实验室的温度应在17~25℃，在试验全部过 程中，应注意室温变化不得大于3℃，防止动物骚动并避免噪声干扰。 5 ．6 ．检查法： 5 ．6 ．1．家兔在试验前至少1 小时开始停止给食并置于宽松适宜装置中，直至试 验完毕。 5 ．6 ．2 ．测量家兔体温应使用精密度为±0.1 ℃的测温装置。 5 ．6 ．3 ．测温探头或肛温计插入肛门的深度和时间各兔应相同，深度一般约为6cm， 时间不得少于1.5 分钟，每隔30 分钟测量体温 1 次，一般测量2 次，两次体温之差不 得超过 0.2 ℃，以此两次体温的平均值作为该兔的正常体温。 5 ．6 ．4 ．当日使用家兔，正常体温应在38.0～9.6℃的范围内，且各兔间正常体温 之差不得超过1℃。 5 ．6 ．5 ．每个供试品用家兔3 只，在测定正常体温后15 分钟内自耳静脉缓缓注入 规定剂量并温热至38℃的供试品溶液，然后每隔30 分钟按前法测量其体温1 次，共测 6 次，以 6 次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温的升高温度 （℃）。如 3 只家兔中有1 只体温升高0.6 ℃或0.6 ℃以上，或3 只家兔体温升高的总和达1.3℃或高 于1.3℃，应另取5 只家兔复试，检查方法同上。 5 ．6 ．6 ．注射前，先用75 ％酒精棉球轻擦家兔耳静脉的注射部位，从耳尖端静脉 进针，如进针不利，则顺序向前进行。 5 ．6 ．7 ．注射完毕，拨出针头时，用75 ％酒精棉球按压针孔数秒钟，止血，注射 时间一般每只家兔不超过3 分钟。 5 ．6 ．8．每隔30 分钟，按前法测家兔体温一次，共测6 次。 5 ．7 ．温差计算： 注射药液