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FISH技术在尿路上皮肿瘤诊断中的临床应会计学第1页/共15页 荧光原位杂交(Fluorescence In Situ Hybridization,FISH)基本原理:应用荧光染料标记探针DNA,变性成单链后与变性后的染色体或细胞核靶DNA杂交,在荧光显微镜下观察并记录结果。Polak J M ,McGee Jo D.In Situ Hybridizition:Principies and Practice.Oxford University Press,New York.1990.Page ? 第2页/共15页探针能较长 时间保存安全、快速、灵敏度高FISH技术的优点应用范围广泛多色标记,简单直观 尿路上皮癌第3页/共15页1.膀胱癌2.肾盂癌3.输尿管癌Page ? 影像学检查细胞学检测尿路上皮癌临床常用检测尿液肿瘤标记物内镜检查第4页/共15页Page ? 第5页/共15页尿路上皮癌FISH检测临床特点1从基因水平早期诊断,早于细胞形态学改变 2影响因素少 敏感性(80%)和特异性高(96%) 3Peter R,Gabor L,Csilla P,et al.Detection of bladder cancer from the urine using fluorescence in situ hybridization technique.Pathology Oncology Resarch,2009,13(3):187-194.Page ? 第6页/共15页2007年卫生部医药卫生科技发展研究中心课题《荧光原位杂交技术在膀胱癌检测的多中心临床应用研究》全国共有54家单位参与课题研究,完成合格病例数为 4809例。Page ? 第7页/共15页FISH方法与常规尿脱落细胞学检查的比较FISH(%)脱落细胞学(%)敏感度83.20%31.90%特异度91.30%94.20%阳性预测值99.50%99.30%准确率84.00%36.20%穆大为,等. 北京大学学报(医学版), 2010,42(4):381-385肾盂癌的鉴别诊断尿路上皮肿瘤治疗后的监测血尿鉴别诊断 (尿路上皮肿瘤的早期诊断)第8页/共15页FISH的临床意义Page ? 第9页/共15页血尿的鉴别诊断Page ? 第10页/共15页尿路上皮肿瘤术后监测FISH非创伤性FISH结果不受治疗影响FISH能早期发现肿瘤复发Degtyar P,Neulander E,Zirkin H,et al.Fluorescence in situ hybridization performed on exfoliated urothelial cells in patients with transitional cell carcinoma of the bladder.Urology,2008,63(2):398-401. Page ? 第11页/共15页肾盂癌鉴别诊断肾盂、输尿管、膀胱均被覆尿路上皮影像学不能鉴别时Page ? 第12页/共15页第13页/共15页本科FISH检测结果第14页/共15页谢谢FISH技术是一种非放射性分子遗传学实验技术,直接检测或通过免疫荧光系统检测,最后在荧光显微镜下显影,即可对待测DNA进行定性、定量或相对定位分析。 可应用于新鲜、冷冻或石蜡包埋标本以及穿刺物和脱落细胞等多种物质的检测首先我们看一膀胱癌的流行病学,膀胱癌是泌尿生殖系统中最重要的肿瘤,在全世界范围内,膀胱癌发病率居恶性肿瘤的第九位。在我国,膀胱癌的发病率要低一些,根据2002年的数据,男性发病率为十万分之3.8,女性发病率为十万分之1.4,男性比女性发病率高,男女比3至4比1。而且,部分城市,像上海,武汉,中山等城市报告膀胱癌有增加的趋势。关于膀胱癌的临床特点,我觉得有两点值得注意,一是膀胱癌是有90%以上是移行细胞癌,只有极少数是鳞癌和腺癌,因此膀胱癌的诊断,首要是移行细胞癌的诊断。另外,膀胱癌容易复发,即便是级别较低的肿瘤,也有很高的复发率,约有10-67%左右的病人会在术后第12个月复发,24-84%的患者在术后5年内复发,这揭示我们,对膀胱癌来说,方便的术后监测技术尤其重要。相对膀胱癌而言,肾盂癌和输尿管癌的恶性程度较高,诊断相对比较困难,临床诊断时已属于中晚期,预后较差。因此,早期诊断和治疗显得十分重要。影像学检查可以发现0.5cm的肿瘤,随着多排螺旋CT的应用,可以发现1mm的肿瘤,但是对原位癌的诊断仍有困难。细胞学检测 灵敏度13-75%,特异性85-100%细胞学方法对低级别膀胱癌的敏感性相当低,这就限制了在早期发现中的应用。 膀胱镜检查 侵入性 膀胱镜是目前诊断膀胱癌最可靠的方法,通过膀胱镜可以发现是否有肿瘤,明确肿瘤的数目,大小,形
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