胰岛素肾上腺素对血糖浓度影响.pdfVIP

文档从互联网中收集，已重新修正排版，word 格式支持编辑，如有帮助欢迎下载支持。 实验五胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 教学目的与要求： 1、观察胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响。 2、掌握血糖浓度的测定方法。 3、掌握葡萄糖氧化酶法测定血糖浓度的原理和方法。 4 、掌握血糖浓度的正常参考值，了解血糖测定的临床意义。 一、实验原理 （一）胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 激素是调节机体血糖浓度的重要因素。胰岛素能降低血糖，肾上腺素等激 素能升高血糖。 本实验给两只家兔分别注射胰岛素或肾上腺素，取注射前、后兔的静脉血， 测定血糖含量，观察注射前后血糖浓度变化，从而了解胰岛素和肾上腺素对血糖 浓度的影响。 （二）葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 本实验是葡萄糖氧化酶 (GOD)和过氧化物酶 (POD) 相偶联发生的偶联反 应。 第一步：葡萄糖氧化酶利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。 第二步：过氧化物酶在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原 性氧受体 4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物(苯醌亚胺非 那腙) 。 二、操作步骤 （一）胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 1、动物准备：取正常家兔两只，实验前预先饥饿16 小时，称体重(—般为2-3kg) 。 2、注射激素前取血：—般多从耳缘静脉取血：剪去耳毛，用二甲苯擦拭兔耳， 1如有帮助欢迎下载支持 文档从互联网中收集，已重新修正排版，word 格式支持编辑，如有帮助欢迎下载支持。 使其血管充血，再用干棉球擦干，于放血部位涂一薄层凡士林，再用粗针头 或刀片刺破静脉放血。采用葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法时，则将静脉血收 集于干净试管中,静置至血清析出。取血完毕，用干棉球压迫血管止血. 3、注射激素：—只兔子注射胰岛素；皮下注射，剂量为0.75U/kg 体重。另一只 兔子注射肾上腺素：皮下注射，剂量为0.4mg/kg 体重。分别记录注射时间。 4 、注射激素后取血：方法同上；取血时间：肾上腺素注射后30 分钟；胰岛素注 射后 1 小时。从注射胰岛素的兔子取血后，应立即用 10ml 250g/L 葡萄糖做 腹腔内或皮下注射，以防家兔发生胰岛素休克(低血糖休克) 。 5、测定血糖：分别测定各血样的糖含量，方法请见实验四“血糖测定”。 6、计算：计算注射胰岛素后血糖降低和注射肾上腺素后血糖增高的百分率： BS 血糖改变百分率(%)  100% 注射前BS △BS=注射后BS—注射前BS ；“+ ”值表示BS 升高；“—”值表示BS 降低 (BS—血糖) 。 （二）葡萄糖氧化酶法测定血清葡萄糖 1、取试管3 支，按下表操作。 葡萄糖氧化酶法测血糖操作步骤 加入物(ml) 空白管 标准管 测定管 血清 － － 0.01 葡萄糖标准应用液 － 0.01 － 蒸馏水 0.01 － － 酶酚混合试剂 1.5 1.5 1.5 混匀，置37℃水浴中，保温15min，加2ml 水混合后在波长505nm 处比色， 以空白管调零，读取标准管及测定管吸光度。 2、计算： 测定管吸光度 血清葡萄糖(mmol/L)  5 标准管吸光度 2如有帮助欢迎下载支持