生物工程设备及操作技术-06 动、植物细胞（组织）培养反应器.pptVIP

三、选择题 1.中空纤维培养装置，是由若干根中空纤维管组成，每根中空纤维管的内径为（ ）μm，壁厚为（ ）μm。 A.100 50~80 B.120 60~90 C.180 50~80 D.200 50~70 2.动物细胞微载体悬浮培养的基本原理，是利用（ ）作为载体，细胞在载体的表面附着，通过连续搅拌使其悬浮于培养液中，并进行单层生长、繁殖。 A.气泡 B.固体小颗粒 C.液滴 D.气泡包裹的小颗粒 3.用于动物细胞培养的微载体颗粒直径要均匀，径差小于（ ）μm。 A.20~25 B.6~9 C.14~36 D.20~80 4.植物细胞培养所用的生物反应器，主要有机械搅拌反应器和（ ）反应器。 A.真空吸气反应器 B.非机械搅拌 C.微型气升式反应器 D.液体搅拌反应器 四、判断题 1.气升式细胞培养反应器，在动物细胞培养中取得了很大成功。（ ） 2.把生物活性物质、完整的活细胞或组织包在薄的半透膜中，即称为胶囊技术。（ ） 3.微囊内的活细胞由于不具有半透性微囊外膜，固可以防止污染和物理损伤。（ ） 4.锥形动物细胞微载体悬浮培养反应器，是一个圆锥形筒体，圆锥形筒体内装有一个可旋转的塑料丝网气腔。（ ） 5.膜反应器的膜固定化，是采用具有一定孔径和选择透过性的膜固定植物细胞。（ ） 五、问答题 1.简述动、植物细胞培养装置各自的特点。 2.动物细胞培养装置主要有哪些类型？其结构如何？ 3.植物细胞培养装置主要有哪些类型？其结构如何？ 思考与练习 （三）气腔式动物细胞微载体悬浮培养反应器 反应器内有个可旋转的圆筒，圆筒上部设有3~5个中空导向搅拌桨叶，圆筒外壁上用200目（孔径约75μm）的不锈钢丝网焊成一个环状气腔，气腔下面有一圈气体分布管。 6.1 动物细胞培养反应器 图6-11 气腔式动物细胞微载体悬浮培养反应器 6.1 动物细胞培养反应器 反应器运转时，圆筒由轴联动一起以0~50r/min转速旋转。培养液由于中空导向桨叶的搅动作用，液体与微载体悬浮液由圆筒下部吸入，从中空导向桨叶流出，形成循环流动。在气腔内气体由分布管鼓泡，气体溶于液体中，依靠气腔丝网外液体的循环流动及扩散作用，使溶于液体的气体成分均匀分布到反应器内。使用200目丝网的作用，是保证微载体不进入到气腔，气泡也不流入培养悬浮液中，避免气泡直接与动物细胞接触。 该反应器还带一个进入气腔的混合气体（O2、N2、CO2和空气）调气系统，用于自动控制溶氧和pH。该反应器操作较方便，转速控制稳定。 （四）锥形气腔式动物细胞微载体悬浮培养反应器 外壳是圆锥形筒体，圆锥形筒体内装一个可旋转的塑料丝网气腔。气腔尖端部带有一螺旋桨搅拌器，靠螺旋桨翻动，使培养液循环流动，也使微载体悬浮于培养液中。在塑料丝网气腔内，有一圈气体鼓泡管，同样也有四种气体通过配比调节来控制培养液的pH和溶氧浓度，以满足动物细胞生长所需要的条件。 6.1 动物细胞培养反应器 图6-12 锥形气腔式动物细胞微载体悬浮培养反应器 6.1 动物细胞培养反应器 广义的植物细胞培养技术，包括植物器官、组织、细胞以及原生质体培养，并以此发展起来的各种植物细胞培养技术。植物细胞（组织）培养反应器的研制，是植物细胞培养技术向工业规模发展关键。不同植物细胞的生理、代谢方式不同，培养方式也不同。 一、植物细胞培养过程的特点 微生物培养中许多技术可用于植物细胞培养，但由于植物细胞本身固有特性，如细胞大小、细胞块形状、培养液黏度等，要建立适合于植物细胞培养的装置，必须了解植物细胞的有关性质。 6.2 植物细胞（组织）培养反应器 （一）细胞培养液的性质 植物细胞比微生物大得多，在低倍光学显微镜下能很容易观察到它的形态。如烟草细胞比微生物细胞大50~100倍，细胞体积要膨大105~106倍，细胞在培养液中所占体积高达40~50%。细胞培养过程中，细胞形态有明显变化。以间歇培养为例，在培养初期，多半是较大的游离细胞。接着便开始分裂，随着分裂，原来较大细胞分裂成一个个较小细胞。同时，较小细胞就聚集成细胞块。在生长停止后，细胞便伸长、涨大，块状细胞就游离分散。 6.2 植物细胞（组织）培养反应器 （二）植物细胞培养中的传递状态 在植物细胞大规模液体培养中，为供给必要的氧，须通气和搅拌。这在工业规模生产中，是影响生产成本的重要因素。培养的烟草细胞氧消耗的最大值为0.6mmol/[g（干重）/h]，而微生物深层培养时氧的消耗速度为1.5~8mmol/[g（干重）/h]之间。 可见，植物细胞培养的需氧量要低得多。 6.2 植物细胞（组织）培养反应器 图6-13 起始KLα和最终细胞浓度的关系（培养144h） 6.2 植物细胞（组织）培养反应器 二