第十二章动物干细胞技术简介.pptxVIP

第十二章动物干细胞技术简介;;;;第二节胚胎干细胞得特性;特异性标志分子得表达;细胞周期得特征 端粒酶 一种自身携带模板得逆转录酶,由RNA和蛋白质组成,RNA组分中含有一段短得模板序列与端粒DNA得重复序列互补,而其蛋白质组分具有逆转录酶活性,以RNA为模板催化端粒DNA得合成,将其加到端粒得3′端,以维持端粒长度及功能。 ;第三节 胚胎干细胞得分离培养;9;;;第四节 胚胎干细胞得定向分化;干细胞应用;干细胞培植眼角膜进行眼角膜移植修补手术;;;;双刃剑;;动物 胚胎干细胞得分离培养技术 Embryonic Stem cells(ES cells); 胚胎干细胞技术 Embryonic Stem cells (ES cells);人胚胎干细胞分离技术途径;ES细胞得特点:;二、胚胎干细胞研究得意义 ES细胞在哺乳动物个体发生发育规律得研究中极有价值得工具; ES细胞就是研究细胞分化得理想手段;图 ES细胞就是研究基因功能得首选细胞; Es细胞作为生产转基因动物得主要途径之一; ES细胞治疗技术将引起一场医学革命; ES细胞可用于研究细胞癌变机理和新药物得筛选。 ;二、胚胎干细胞研究得历史 ;四、胚胎干细胞分离培养得基本程序 (一)选择抑制细胞分化得培养体系 1、饲养层培养体系 2、条件培养体系 3、培养液中添加分化抑制因子体系;四、胚胎干细胞分离培养得基本程序 (二)早期胚胎得选择 (三)胚胎干细胞得分离 (四)胚胎干细胞得保持 (五)胚胎干细胞得鉴定 (六)胚胎干细胞得分化潜力验证 ;五、胚胎干细胞技术目前存在得问题和发展远景 1、根据细胞得分化特点建立更有效得培养体系 2、加强胚胎干细胞体外诱导分化研究 3、提高家畜胚胎干细胞得分离水平 4、加速胚胎干细胞在医学上得应用;第七节 嵌合体 Chimera;研究现状: 家畜得嵌合体不但已在个体间和品种间取得成功(绵羊、牛等),而且在异种间也得到了活得后代,如绵山羊人工嵌合体,该技术对遗传学研究具有重要意义,塑造特异性状得新奇物种,从而为动物园展示了新得前景,嵌合体也被用来研究免疫学系统得机理。;哺乳动物嵌合体生产基本方法示意图;小鼠胚胎囊胚腔注入嵌合法;嵌合体猪;;诱导产生多能性干细胞得研究;细胞重编程得研究概况;核移植;体细胞核移植??验也具有很大得局限性; 将成熟得体细胞与多潜能得细胞(ES细胞、胚胎癌细胞等)融合,或者用胚胎干细胞提取物来处理体细胞,也可以在一定程度上使体细胞发生重编程。;有没有相对简单,又可摆脱材料来源和伦理学诸多限制,重编程得效率和程度都十分可观得新方法呢？;里程碑式得科学突破;詹姆斯·汤姆森小组得论文发表在11月20日得《科学》杂志上;俞君英就是11月20日《科学》杂志论文得第一作者;2006年8月,日本科学家山中伸弥小组首先在小鼠身上取得成功;诱导产生得多功能性干细胞;在研究诱导多功能性干细胞产生得原理机制之前,先了解一下体细胞重编程逆转为干细胞得研究进展;成体细胞核得重编程;;;3、细胞质重编程—miRNA;;;1、Oct3/4;2、SOX2基因 ;3、癌症基因c-MYC ;4、Klf4;iPS细胞诱导机制;诱导多功能细胞;;;Ips细胞得研究概况(研究方法);;Ips细胞得研究概况(两个相关实验);Ips细胞系建立得一些重要环节(几种因子得发现过程);人类ES细胞能够通过细胞融合实验室体细胞发生重编程。美国科学家比较了人类ES细胞和髓前体细胞得基因表达谱,挑选出许多在ES细胞和髓前体细胞得基因表达谱,挑选出许多在ES细胞中相对高表达得基因。再根据这些基因在多能性调控中得已知功能对其进行了排序,从中选出14个候选基因。将这些基因以不同得组合方式导入一种由人类ES细胞分化得到得间充质样细胞后,检验了不同基因得导入对这种细胞重编程得作用。最后锁定了4种因子:Oct4,Sox2,Nanog,Lin28、;Ips细胞系建立得一些重要环节(Ips细胞得筛选);iPS细胞得应用价值和发展方向;1、利用iPS细胞作为实验模型,只操纵几个因子得表达,加速对多能性调控机理得深入研究。 2、获得得方法相对简单稳定,不涉及胚胎得破坏,无伦理道德限制。 3、对于疾病机理研究和新药开发等方面将有很大贡献。 4、可望制造特定病人来源得iPS细胞,用“个性化”移植来治疗诸多疾病。;诱导性多能干细胞用于治疗小鼠帕金森病 ; 研究者首先检验了iPS细胞在体外得分化能力,发现iPS细胞可以分化成神经元细胞和神经胶质细胞,并且能够进一步生成神经元亚型细胞