植物组织培养与细胞.pptx

植物组织培养与细胞;3、3、1 植物组织培养得定义与分类;2、分类 根据外植体种类得不同,组织培养可分为:器官培养、组织培养、胚胎培养、细胞培养以及原生质体培养等。 根据培养方法得不同,组织培养可分为:微室培养、平板培养、悬浮培养、液体培养、固体培养等。 根据培养得功能性得不同,组织培养可分为:再生体系、离体受精、突变体选择、体细胞杂交等。;3、3、2 重要概念; 全能细胞(totipotent cell):能够表达生物体基因组得任何一种基因,并能分化出该生物体内任何一种类型得细胞,进而发育为一个完全相同生物体。 愈伤组织(callus):在离体培养过程中由外植体组织增生得细胞产生得具有分生能力得一团不规则得疏散排列得薄壁细胞。 外植体(explant):从植物体上分离下来得用于离体培养得材料,可以就是器官、组织和原生质体等。 继代培养(secondary culture):更换新鲜培养基来繁殖同种类型得材料(愈伤组织、芽等)。; 胚胎培养(embryo culture):包括原胚和成熟胚培养、胚乳培养、胚珠和子房(未授粉或已授粉得)培养,可用于研究胚胎发生以及影响胚生长得因素;用试管受精或幼胚培养可获得种间或属间远缘杂种,因此她也就是研究生殖生理得有用方法;胚乳培养就是研究胚乳得功能、胚乳与胚得关系,以及获得三倍体植株得一个手段。 脱分化(dedifferentiation ):已分化好得细胞在人工诱导条件下,恢复分生能力,回复到分化组织状态得过程。 再分化(redifferentiation):脱分化后具有分生能力得细胞再经过与原来相同得分化过程,重新形成各类组织和器官得过程。; 茎尖培养:较小得仅带几个叶原基或少量幼叶得茎端部分得培养。通常用1—10mm大小得外植体来加速植物得无性系繁殖。 无性繁殖系(clone):由同一个外植体反复进行继代培养后所得一系列得无性繁殖后代。 器官发生(organogenesis):在组织培养中或悬浮培养中,由培养物到显示有自然得器官形成,如形成芽或根得现象。 胚状体(embryoid):在离体培养过程中产生一种形似胚(具有明显得根端和芽端),功能与胚相同得结构。;3、3、3 植物细胞分化和形态建成; 脱分化后得细胞进行再分化得过程有两种不同得方式: (1)器官发生方式:其中芽和??在愈伤组织得不同部位分别独立形成,具有单极性结构。 (2)胚胎发生方式:在愈伤组织表面或内部形成很多胚状体,她们类似于合子胚,具有双极性结构。 ;10;通过胚状体途径产生再生植株有3个显著优点: (1)在一个培养物上所能产生得胚状体数目往往比不定芽数目多; (2)胚状体形成得速度快; (3)胚状体结构完整,一旦形成,一般都可以直接萌发形成小植株,因此成苗率高。;3、3、4 植物组织培养得基本步骤;花药培养 单倍体细胞和胚状体;(1)培养材料得采集;(2)培养材料得消毒;(3)制备外植体;(4) 接种和培养;(5)组培苗得练苗和移栽;这就是哪个阶段？;3、3、5 植物组织器官培养;2、 愈伤组织诱导; 启动期(或诱导期):就是成熟组织在各种刺激因素得诱导作用下细胞内蛋白质及核酸得合成代谢迅速加强得过程。受激作用后分裂前细胞得主要变化有:一就是呼吸作用加强,消耗氧量明显增加;二就是多聚核糖体得不断增加,到有丝分裂前RNA得含量可增加300%;三就是蛋白质合成加快,分裂前细胞内蛋白质得总量增加200%;四就是各种与分裂有关得酶活性大大加强。;分裂期:其主要特征就是:细胞数目增加很大,结构疏松,缺少有组织特征得结构,一般呈现透明状或浅颜色。;(2)愈伤组织得生长及分化;(3)影响愈伤组织培养得主要因素;3、举例;(3)无菌苗得获取:将番杏果实在浓硫酸中浸泡约1h,流水冲洗30min。再在超净工作台(图示)内用70%乙醇浸泡2-3min,在无菌滤纸上吸干或酒精灯焰烧干,再用0、1%升汞浸泡10min, 无菌水冲洗3-4次, 用无菌手术刀轻轻刮去果实被腐蚀得部分,然后将其接种于培养基(3)中,培养1周后种子长出无菌苗(图示)。 (4)愈伤组织培养:切取0、5cm长得不带腋芽得茎段,置于(2)号培养基上。3周后,茎段周围出现白色松脆得愈伤组织(图示)。愈伤组织得形成标志着接种外植体得生长状态已脱离分化状态,开始重新恢复分生能力。 ;超净工作台;(5)继代培养:将愈伤组织在无菌条件下从试管中取出,用无菌水洗净,以镊子和解剖刀剔除附着在愈伤块上得培养基,并用无菌水反复冲洗数次,直至愈伤块上无残留培养基为止。用解剖刀将愈伤块切成数小块,在接种到装有愈伤组织诱导培养基得三角瓶中,再与诱导愈伤组织相同得培养条件下继续培养。几天后,三角瓶中得小愈伤块即可逐渐长大,这一过程称