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3.1菊花的组织培养 第一页,共二十九页。 (一)、植物组织培养的基本过程 1.理论基础:________________。 2.细胞分化:植物的个体发育过程中,细胞在_____、结构、生理功能上出现_____________的过程。 细胞的全能性 形态 稳定性差异 一、基础知识 3.过程:______的植物组织或细胞脱分化,愈伤组织 再分化,根、芽→完整植株。 离体 第二页,共二十九页。 离体的植物器官、组织、细胞 脱分化 愈伤组织 再分化 根、芽 植物体 植物组织培养的基本过程 移栽 第三页,共二十九页。 (1)愈伤组织的特点:细胞排列疏松而无规则,是高度_________的呈无定形状态的_______细胞。 (2)脱(去)分化:由高度分化的植物组织或细胞产生_________的过程。 (3)再分化:__________继续培养,重新分化成根或芽等器官的过程。 (4)如何控制细胞的脱分化与去分化? 液泡化 薄壁 愈伤组织 愈伤组织 阅读32页解决下列问题: 通过激素控制 第四页,共二十九页。 1.外植体的选取 △不同植物的组织培养难度 ___________ 差别很大 如烟草和胡萝卜的组织培养较为容易,而枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 如菊花的组织培养,一般选择_____________ 植株茎__________________________。 △对于同一种植物材料,材料的_________、 __________________等也会影响实验结果。 年龄 保存时间的长短 (二)影响植物组织培养的因素 未开花 上部新萌生的侧枝 第五页,共二十九页。 外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好,容易诱导脱分化和再分化。 思 考 ? 在选取菊花茎段的时候,为什么要选取生长旺盛的嫩枝? 第六页,共二十九页。 2.培养基的配制 常用的一种培养基为___________ 其主要成分包括: ______元素:C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S ______元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co __________ :甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 ___________ :生长素、细胞分裂素、赤霉素等 MS培养基 大量 微量 有机物 植物激素 第七页,共二十九页。 思 考 ? 各种营养物质的作用吗?同专题2中微生物培养基的配方相比,MS培养基的配方有哪些明显的不同? 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐; 蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压; 甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对特殊营养的需求。 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养。 第八页,共二十九页。 在植物组织培养的过程中,为什么需要无菌操作? 思 考 ? 植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,对培养条件的要求较高。 用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长。 第九页,共二十九页。 使用顺序 实验结果 先使用生长素,后使用细胞分裂素 有利于______,但_________ 先使用细胞分裂素,后使用生长素 细胞既分裂又分化 同时使用 ___________提高 细胞分裂 细胞不分化 分化频率 3.植物激素 植物激素中_______和___________是启动细胞分裂、 脱分化和再分化的关键性因素。_______________、 _____________以及__________等,都会影响实验结果。 生长素 细胞分裂素 植物激素的浓度 使用的先后顺序 用量的比例 第十页,共二十九页。 生长素/细胞分裂素比值高时 促进______,抑制_________ 生长素/细胞分裂素比值低时 促进______,抑制_________ 生长素/细胞分裂素比值适中时 促进____________ 根分化 芽形成 芽分化 根形成 促进愈伤组织生长 使用量 实验结果 第十一页,共二十九页。 4.环境因素 (pH、温度、光照) 不同的植物对各种条件的要求往往______。 如进行菊花的组织培养,一般将 pH控制在______左右; 温度控制在__________ ; 并且每天用日光灯照射_____ 。 不同 5.8 18~22 ℃ 12h 5.无菌环境 在培养的整个过程中,都需要是一个无菌环境。 无菌技术包括对______和____________ 的消 毒灭菌 培养基 外植体 第十二页,共二十九页。 制备MS固体培养基 外植体消毒 接种 培养 栽培 移栽 二、实验操作
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