广东烟区黄瓜花叶病毒胶体金检测试纸条的研制及应用.docxVIP

广东烟区黄瓜花叶病毒胶体金检测试纸条的研制及应用.docx

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广东烟区黄瓜花叶病毒胶体金检测试纸条的研制及应用 随着人们对食品安全的关注度不断提高,农产品的检测需求也变得越来越重要。其中,病毒是导致农业产品损失的重要原因之一,因此在病毒检测方面的研究也愈加受到关注。 本文主要介绍了一种基于胶体金技术的黄瓜花叶病毒检测方法,其具有灵敏、快速、简单、便携等优点,且能够检测到田间样品中的黄瓜花叶病毒。 一、研制方法 1. 材料 (1)黄瓜花叶病毒抗体; (3)胶体金颗粒; (4)棉签; (5)玻片; (6)磁性棒。 2. 操作步骤 (1)制备抗原 将黄瓜花叶病毒感染过的植物组织磨碎,加入0.1mol/L的磷酸缓冲液,离心沉淀,收集上清液,即为抗原。 (2)制备胶体金标记 将胶体金颗粒和黄瓜花叶病毒抗体混合,在加入一定浓度的NaCl和Tween-20后,振荡混合,旋离沉淀,最后用0.1mol/L的磷酸缓冲液悬浮,制备成胶体金标记。 (3)制备试纸条 在玻片上贴上2mm宽的双面胶,将左右两侧各切下一条0.5cm宽的滤纸,中间用悬浮液渗透纸条。 (4)检测操作 将棉签蘸取待检测田间样品汁液,加入0.1mol/L的磷酸缓冲液,旋离沉淀,加入胶体金标记,振荡反应,使用磁性棒吸附胶体金-抗原-抗体复合物到试纸条上,等待5-10分钟后,观察试纸上是否出现红色。 二、检测结果 本方法将样品检测视为阳性和阴性两种情况,阳性样品可得到红色反应,阴性样品则无反应。检测结果还与病毒的浓度相关,病毒浓度越高,反应色越深。此外,在不同病毒感染程度下,本方法的检测灵敏度达到了10ng/mL。 三、应用展望 本方法的研制为病毒检测提供了一种新的选择。相比于传统的检测方法(如ELISA法、PCR法等),该方法具有操作简单、检测时间快、灵敏度高、使用便携等优点,且克服了传统方法需要复杂的设备和技术的缺陷。因此,胶体金检测试纸条在田间样品检测中具有广泛的应用前景。同时,本研究对于胶体金检测技术的发展也具有一定的借鉴意义,可为其他病毒检测方法提供参考。

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