重症肌无力自身抗体实验室诊断专家共识(2023).pptxVIP

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重症肌无力自身抗体实验室诊断专家共识(2023) 前言重症肌无力(myasthenia gravis,MG)是一种由自身抗体介导的神经?肌肉接头(neuromuscular junction,NMJ)信号传递障碍的获得性自身免疫性疾病。临床上,MG患者呈现波动性的骨骼肌疲劳无力症状,而自身抗体检测是国内外MG临床诊断的重要辅助检查之一。目前,MG患者血清中发现的与神经?肌肉接头结构或骨骼肌胞质成分相关的自身抗体达10余种,包括乙酰胆碱受体(acetylcholine receptor,AChR)抗体、肌肉特异性受体酪氨酸激酶(muscle?specific receptor tyrosine kinase,MuSK)抗体、低密度脂蛋白受体相关蛋白4(low?density lipoprotein receptor?related protein 4,LRP4)抗体、连接素(titin)抗体、兰尼碱受体(RyR)抗体、聚集蛋白(agrin)抗体、Kv1.4抗体、ColQ蛋白抗体、皮质蛋白(cortactin)抗体、胶原(collagenXIII)抗体和突触受体关联蛋白(rapsyn)抗体等。 前言欧美国家如美国和英国等将AChR和MuSK抗体作为临床表现高度提示MG患者的首选诊断指标,抗体阴性患者再进行其他辅助诊断如重复神经电刺激、单纤维肌电图等来进行MG诊断。我国MG诊断和治疗指南(2020版)提到在患者具有典型MG临床特征(波动性肌无力)的基础上,满足药理学检查、电生理学特征以及血清抗AChR和MuSK?等抗体检测中的任意1 项即可作出MG诊断。因此,抗AChR和MuSK抗体是国内外MG诊断的重要实验室检测指标。在实验室检测中,AChR和MuSK抗体具有多种检测方法学。本专家共识结合当前MG自身抗体诊断方法学研究进展,对MG自身抗体的检测方法学选择给出指导性建议。 AChR和MuSK抗体检测方法学概况对于AChR抗体和MuSK抗体常见的检测方法包括放射免疫沉淀法(radioimmunoprecipitation assay,RIPA)、酶联免疫吸附测定法(enzyme?linked immunosorbent assay,ELISA)和细胞免疫荧光法(cell?based assay,CBA),既往研究表明这些检测方法的特异度和敏感度存在客观差异。方法学选择影响自身抗体检测结果的准确性。以MG最常见的AChR抗体检测为例,国内外研究结果表明:(1)AChR抗体的RIPA检测方法具有高特异度(99%)。在敏感度方面,RIPA可以在约85%的全身型MG和50%的眼肌型MG患者血清中检测到AChR抗体。RIPA的自身局限性包括放射性核素的使用、对眼肌型MG的AChR抗体检出率偏低和不能完全避免假阳性等。 AChR和MuSK抗体检测方法学概况(2)AChR抗体的ELISA检测具有易操作的标准化试剂盒和可以抗体定量分析等优势。在敏感度方面除个别研究外,多数研究结果提示ELISA对检测MG患者AChR等抗体的敏感度低于RIPA或CBA。(3)AChR抗体的CBA检测方法有10余年的发展历程。与RIPA相比,CBA对AChR抗体具有相似的高特异度,同时CBA能显著提高RIPA血清阴性MG样本的AChR抗体检出率。例如,国内外研究表明CBA可以从21%~56%的RIPA AChR阴性血清中检测到AChR抗体。 AChR和MuSK抗体检测方法学概况这种敏感度差异主要在于CBA提高了对低丰度或聚集性AChR抗体的检出率。聚集性AChR抗体具有致病性和激活补体反应,常见于眼肌型MG患者(68.8%),也可存在于全身型MG患者(18.8%)。这种CBA阳性、RIPA阴性的聚集性AChR抗体越来越受到临床关注,部分国家已将CBA作为低丰度或聚集性AChR检测的推荐方法写入MG诊断指南。CBA的局限性在于标准化产品少,在国内外主要以临床实验室自建项目(laboratory developed test)提供诊断服务。 AChR和MuSK抗体检测方法学概况MuSK抗体常见于部分AChR抗体阴性的MG患者(10%~40%),少数情况下与AChR抗体或LRP4抗体共同存在。RIPA对MuSK抗体检测的特异度接近100%,但在不同研究中RIPA对MuSK抗体的检出率存在较大差异(0~70%),因此RIPA对MuSK抗体检测的敏感度仍待进一步研究。MuSK抗体的ELISA检测具备商业化试剂盒,研究提示ELISA对MuSK抗体检测的敏感度略低于RIPA和CBA。CBA对MuSK抗体同样具有类似RIPA的高特异度,在敏感度方面也有一定程度改善。 AChR和MuSK抗体检测方法学概况例如,一项包含633例经RIPA法检测AChR和MuSK抗体双阴性的MG样本研究结果显

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