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分子生物学生物信息传递上;● 基本概念 ● 转录起始： RNA聚合酶、启动子 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 ;一、基本概念;◆ RNA主要以单链的形式存在 ◆转录后得到的RNA要经过加工才能变成成熟的mRNA ◆ 转录产物还可以变为rRNA和tRNA。;参与转录的物质; ;;无论在原核还是真核细胞中，RNA链的合成都具有以下几个特点：;转录的不对称性：;;;● 基本概念 ● 转录起始： RNA聚合酶、启动子 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 ;二、参与转录起始的关键酶与元件转录机器（p69）即是转录复合物，其最核心成分是RNA聚合酶。;全酶=核心酶+ σ亚基 （大肠杆菌为例）;大肠杆菌RNA聚合酶的组成分析;● 真核生物RNA聚合酶;RNA polymerase II (RNA 聚合酶II）; 在转录的不同阶段，RNA聚合酶将同DNA结合，形成不同的复合物： 在识别阶段，聚合酶与启动子可逆性结合形成封闭二元复合物。 接着，结合处DNA双链解开，封闭复合物变为开放二元复合物。 转录开始，由RNA聚合酶、DNA和新生RNA形成三元复合物。;转录因子（transcription factor);全酶=核心酶+ σ因子;（二） 启动子(promoter);几个基本概念;上游序列（upstream)：转录起点前面，即5‘端的序列 下游序列(downstream)：转录起点后面，即3’端的序列 描述碱基位置时，起点为+1，下游方向依次为+2，+3.。。。 上游方向依次为－1，－2，－3.。。。。;1. 启动子区的基本结构 原核生物中经对启动子的比较，它们有共有序列： 在上游10bp处为TATAAT，又称为Pribnow盒 在上游35bp处为TTGACA。 ;;大肠杆菌RNA聚合酶全酶所识别的启动子区;真核生物启动子的结构;1、核心启动子;2、上游启动子元件;-10区与-35区的最佳距离 原核生物中， -10区与-35区之间的距离大约是16～19bp，小于15bp或大于19bp都会降低启动子的活性。 细菌中常见的两种突变： 下降突变：使结构基因转录水平下降 上升突变：提高结构基因的转录水平;5. 增强子及其功能 增强子（enhancer）：能提???转录起始效率的序列被称为增强子or强化子。;增强子的特点（p80）： 远距离效应。一般位于上游-200bp处。 无方向性。可位于靶基因的上游、下游或内部。 顺式调节。只调节位于同一染色体上的靶基因。 无物种和基因特异性。可连接到异源基因上发挥作用。 有组织特异性。需要特定的蛋白因子参与。 有相位性。其作用与DNA的构想有关。 有的增强子可以对外部信号产生反应。;6. 转录的抑制 转录抑制剂根据其作用性质主要可以分为两大类： DNA模板功能抑制剂，与DNA结合而改变模板的功能。 RNA聚合酶抑制剂，与RNA聚合酶结合而抑制其活力。 除上述抑制剂外，还有一些嘌呤和嘧啶的类似物，如5-氟尿嘧啶等，可以作为核苷酸代谢拮抗物来抑制核酸前体的合成。;● 基本概念 ● 转录起始： RNA聚合酶、启动子 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 ;三、转录的基本过程;2. 转录起始 RNA聚合酶结合到启动子上以后，使启动子附近的DNA解旋并解链，形成转录泡以促使核糖核苷酸与模板DNA配对。 转录起始即是RNA链上第一个核苷酸链的产生。 无需引物。 起始后直到形成9个核苷酸的过程是通过启动子阶段，此时RNA聚合酶一直在启动子处，之后进入正常延伸。 ;3. 转录延伸 转录延伸即是RNA聚合酶释放σ因子离开启动子后，核心酶沿着模板DNA移动并使新生RNA链不断伸长的过程。 4. 转录终止 当RNA链延伸到终止位点时，RNA将停止合成，转录泡瓦解，DNA链复原，新生RNA链和RNA聚合酶将被释放下来。这即是转录终止。;4、转录终止;1. 不依赖于ρ因子的终止;不依赖?因子的终止（p91）; 终止效率与GC二重对称序列和寡聚U的长短有关，长度 效率 ;依赖?因子的终止有些终止点的DNA序列缺乏共性，不能诱导转录的自发终止，需要ρ因子的参与。;“穷追”模型(hot pursuit) ;● 基本概念 ● 转录起始： RNA聚合酶、启动子 ● 转录的基本过程 ● 转录后加工 ● 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 ● RNA合成与DNA合成异同点 ;四、转录后加工