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第三十一页，共四十七页。 WSK卧式高效全能珠磨机 Crushing in ball mill 珠磨法 第三十二页，共四十七页。 ZM系列卧式密闭珠(砂)磨机 第三十三页，共四十七页。 * 发酵工程 (3) 第一页，共四十七页。 6.5 发酵工程的下游技术 从发酵液中分离、纯化目的产物的过程称为下游加工工程（downstream processing）。这一过程由一些化学工程单元组成。 这一过程在整个生产中所占成本较高，传统发酵工厂中占总投资的60%；重组蛋白生产企业这部分费用占生产费用的80%——90%。 第二页，共四十七页。 6.5.1 发酵工程下游技术概论 1.特点： ①产物在初始料中含量较低,而产品要求纯度高、无菌、无热原； ②含有大量细胞及代谢产物； ③产物稳定性差，易失活变性； ④产物的种类繁多、结构不一、活性各异； ⑤代价昂贵,回收率低。 第三页，共四十七页。 几种产品在发酵液中的浓度 产品 典型浓度（g/L） 抗生素 25 氨基酸 100 酒精 100 有机酸 100 酶 20 蛋白质 10 第四页，共四十七页。 6.5.1 发酵工程下游技术概论 2.建立分离纯化工艺的根据 发酵产物其上游过程的各种因素对分离、纯化工艺有影响。包括： 　　①菌种的类型及其代谢特性。 　　②原材料培养基的来源及其质量。 　　③物料中杂质的种类和性质。 ④生产工艺及条件。 　　⑤目的产物特性。 　　⑥产品质量的要求 第五页，共四十七页。 3. 一般程序 (1). 预处理和固液分离：加速固液相分离 (2). 细胞破碎分离胞内产物 (3). 初步纯化（提取）：除去与目的产物性 质差异很大的杂质 (4). 高度纯化（精致）：除去与产物性质相 似的杂质 (5). 产品加工 第六页，共四十七页。 生物产品分离纯化的一般步骤 发酵液或培养液 细胞产物 胞外产物 胞内产物 离心或过滤细胞 （洗涤） 离心或过滤 （洗涤) 离心或过滤 （洗涤） 细胞破碎 （化学法机 械法等） 整体细 胞萃取 离心、过滤 干燥 分离剂回收、再生 提取、分离 沉淀、吸附、萃取、过滤等 分离剂回收、再生 纯化、精制 层析、结晶、电泳等 干燥 废物 产物 产物 滤液 循环 副产物 废物 滤渣 副产物 循环 废物 细胞 滤渣 副产物 废物 细胞 含产物的清液 预处理阶段 第七页，共四十七页。 4.分离纯化的技术 ①技术条件温和能保持产物生物活性。 ②选择性好，能从复杂的混合物中有效的将目的产物分离，达到较高的纯化倍数。 ③收率要高。 ④两个技数间能直接衔接, 不需要对物料加以处理。 ⑤纯化过程要快，满足高 生产率的要求。 第八页，共四十七页。 6.5.2 发酵液的预处理和固液分离方法 1.发酵液的预处理 细菌及某些放线菌菌体细小，发酵液粘度大，不能直接过滤.由于菌体自溶，核酸、蛋白质及其它有机粘性物质的存在会造成滤液浑浊，滤速极慢。在预处理中应采用絮凝或凝聚的方法，设法增大悬浮液中固体粒子的大小，提高其沉降速度，或采用稀释、加热等方法降低粘度，以利于过滤。 分离菌体和其它悬浮颗粒 去除部分可溶性杂质 改变滤液的性质 第九页，共四十七页。 发酵液中杂质很多，其中对提炼影响最大的是高价无机离子（Ca＋＋、Mg十＋、Fe＋＋）和杂蛋白质等。 高价无机离子的存在，会影响树脂对生化物质的交换容量。 杂蛋白质的存在，不仅在采用离子交换法和大网格树脂吸附法提炼时会降低其吸附能力，而且在采用有机溶剂或两水相萃取时，容易产生乳化，使两相分离不清，在预处理时，应尽量除去这些物质。 第十页，共四十七页。 1) 高价无机离子的去除方法 为去除钙离子，宜加入草酸的可溶性盐，如草酸钠。反应生成的草酸钙还能促使蛋白质凝固，提高滤液（也称为原液）质量。 要除去镁离子，可以加入三聚磷酸钠，它和镁离子形成可溶性络合物： Na5P3O10＋Mg＋＋＝Mg N