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输血前检测中解决疑难问题的体会四 川 省人民医院 杨静
输血前检查? 常用方法:盐水法、微柱凝集法,抗球蛋白法、聚凝胺……ABO RhD抗体定型 定型 筛查抗体 交叉鉴定 配血
普遍使用全自动设备是否意味着检测水平的提升?仪器的优越性:? 自动化? 操作简单? 减少人为误差? 结果判读清晰
血型定型中的疑难问题? 正反定不一致的分析思路:正定型弱阳;反定出现多余阳性;反定未能如期出现阳性…? 蛋白凝集,混合视野凝集? 亚型、类孟买血型? 强自身凝集的红细胞
抗体鉴定中的疑难问题? 抗体鉴定的方法的选择? 冷抗体? 自身抗体合并同种抗体? 药物抗体、类抗体? 输血反应
解决疑难问题的知识储备1、免疫血液学基础知识2、人类血型系统知识3、常用血清学检查技术4、输血反应5、与血型免疫系统有关的疾病
试管法凝集判读轻摇离心完毕后轻柔摇动试管至细胞扣悬起振摇继续摇动试管2--3秒,力度大于轻摇轻摇振摇结果
试管法凝集强度示意图
卡凝集强度的判读
卡凝集强度的判读
卡凝集强度的判读
蛋白凝集患者纤维蛋白原升高或异常蛋白血症,如多发性骨髓瘤或巨球蛋白血症,高纤维蛋白症, 促使红细胞表面电荷发生改变,引起患者自身红细胞或反定型红细胞相互叠连和粘连、呈缗钱状或胶团状排列的假凝集多发性骨髓瘤 :? 单克隆浆细胞恶性增殖并分泌大量不正常的单克隆免疫球蛋白? 反定专一性凝集强度减弱? 正反定均可出现假凝集? 自身对照阳性
蛋白凝集蛋白凝集的处理方法镜检:凝集形态的辨别真凝集假凝集
蛋白凝集解决方案 :简易方法: 2滴血清+2滴生理盐水+1滴红细胞离心观察结果:蛋白凝集消散鉴别方法: 冷自身抗体对温度敏感蛋白凝集对温度不敏感,不受2-Me的影响一般无临床意义
ABO 反定出现多余的阳性可能性分析 :1、冷自身抗体2、同种抗体:抗M、抗Lea等3、蛋白凝集方法 :1、4℃增强2、37℃孵育3、抗体筛选、鉴定
卡混合视野
试管混合视野
混合视野ABO正定型时出现混合视野的原因:? 输血后? 亚型(A3/B3)? 血液病抗原减弱? 骨髓移植初期? 嵌合体
混合视野实例:血液科患者,诊断MDS符合A3的格局血液病患者,能出A亚型的报告吗?A BO血型鉴定-A -B -AB -A1 -HA10B0O0自身3+ 0温 mf3+mf1+mf3+0室
混合视野149个A3、B3、A3B3的血样? 93例为白血病、MDS等血液病? 5例确认为输血或移植引起? 15例确认为亚型? 36例原因不明抗原减非血液病弱、无近期输血或移植罕见基因检测上海血液中心
混合视野:微柱凝集卡做抗筛? 纤维蛋白的干扰(常见)? 冷抗体干扰? 血清和红细胞没有混匀? 白细胞干扰? 细胞过于陈旧
类孟买血型实例:门诊产检孕妇:Amh ?-A-B-A1 -AB -H1+A1BO00001+w 4+1+w室温抗H试验:H抗原:OA2BA1A1B孟买与类孟买不表达红细胞H抗原类孟买用血:根据实际交叉配血情况;自体输血
ABO正反定不符时,8个自我问题?1、受检RBC是洗涤后悬浮在生理盐水中的吗?2、检测技术是最敏感的试管法?3、患者年龄是小于1岁还是大于60岁?4、患者血清与O细胞的反应与反定型试剂红细胞的反应是一样的吗?5、患者的临床诊断:血液系统疾病?消化系统?免疫系统?6、患者的丙球蛋白浓度降低吗?是否输注丙球?7、当有混合视野时,是否是输血反应的标本?8、是否是移植的患者?是否考虑过客淋巴综合征?
剂量效应 eeEe? 剂量效应:抗体与抗原纯合的红细胞比抗原杂合的红细胞反应要强,如Rh、MNS、Duf f y、Kidd系统中的抗体? 如果某种抗体只能和相应的纯合子细胞发生反应时,则该抗体有可能被漏检。? 随着时间的推移,有些抗体会减弱甚至无法检出,配血相合,输血后会引起免疫记忆细胞在产生抗体,引起溶血性输血反应。? 对于同种抗体,每次输血都应选择无对应抗原的红细胞成分,而非仅仅配血相合
同种抗体的结果必须永久保存
抗体鉴定的程序和技术? 合格的血液标本? 病历资料:出报告前需掌握3、药物史近期/长期服用抗生素类2、免疫史输血史近期输血史孕产史1、病史目前患的疾病其它基础疾病? 常用技术:盐水法、抗人球法(经典IAT,凝胶卡)、聚凝胺法、酶技术等经典IAT试管法: 能够检测IgG抗体和37 ℃有反应性的IgM抗体。尤其在怀疑血浆干扰、弱自身抗体时
抗体鉴定的程序和技术患者抗体筛查阳性,若时间允许,应做抗体鉴定并评估其临床意义:1、鉴定抗体类型:IgM、IgG2、鉴定抗体种类:自身抗体、同种抗体3、鉴定抗体特异性:抗-?4、抗体效价
抗体鉴定的程序和技术抗体鉴定时,必须灵活的应用各种血清学检测技术,再结合吸收、放散等手段、对抗体特异性做分析:1、观察血清和每个试剂谱细胞的反应结果。2、观察血清和自
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