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转导DNA不能进行整合、重组和复制,但其携带的基因可经过转录而得到表达。 因此群体中仅一个细胞含有DNA,而其它细胞只能得到其基因产物,在选择培养基平板上形成微小菌落 当前第94页\共有154页\编于星期四\17点 转导失败 外源DNA被降解,转导失败。 当前第95页\共有154页\编于星期四\17点 2、 局限性转导 定义:通过部分缺陷的温和噬菌体把供体菌的少数特定基因携带到受体菌中,并获得表达的转导现象。 当前第96页\共有154页\编于星期四\17点 局限转导 温和噬菌体感染 整合到细菌染色体的特定位点上 宿主细胞发生溶源化 溶源菌因诱导而发生裂解时, 在前噬菌体二侧的少数宿主 基因因偶尔发生的不正常切 割而连在噬菌体DNA上 部分缺陷的温和噬菌体 把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中 当前第97页\共有154页\编于星期四\17点 局限转导(specialized transduction) 温和噬菌体感染 整合到细菌染色体的特定位点上 宿主细胞发生溶源化 溶源菌因诱导而发生裂解时, 在前噬菌体二侧的少数宿主 基因偶尔发生的不正常切 割而连在噬菌体DNA上 部分缺陷的温和噬菌体 把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中 当前第98页\共有154页\编于星期四\17点 局限转导(specialized transduction) 当前第99页\共有154页\编于星期四\17点 特点: 噬菌体对供体菌和受体菌都是温和噬菌体 只能转导供体菌的个别特定基因(一般为噬菌体整合位点两侧的基因) 该特定基因由部分缺陷的温和噬菌体携带 缺陷噬菌体由于其在形成过程中所发生的低频率(约10– 5)“误切”,或由于双重溶源菌的裂解而形成(约形成50%缺陷噬菌体) 局限转导噬菌体的产生要通过UV等因素对溶源菌的诱导并引起裂解后才产生。 当前第100页\共有154页\编于星期四\17点 分类:低频转导与高频转导 当前第101页\共有154页\编于星期四\17点 一般的转导现象中,从宿主染色体上切离时发生不正常切离的频率极低,故这种裂解物中的部分缺陷噬菌体的比例是极低的(10 – 4 ~ 10 – 6)。把这种裂解物称为LFT(低频转导)裂解物 。 用LFT裂解物以低 m. o. i(感染复数)感染宿主,就可获得极少量的局限转导子,即低频转导。 A、低频转导(LFT,low frequency transduction) 当前第102页\共有154页\编于星期四\17点 转导的过程 该溶源菌被诱导裂解时,有极少数(~ 10 – 5)的前噬菌体(prophage)发生不正常切离(abnormal excesion),其结果会将插入位点两侧之一的少数宿主基因连接到噬菌体DNA上,通过衣壳的“误包”,就形成了一种特殊的噬菌体——缺陷噬菌体(defective phage)。它们没有将宿主溶源化的能力,而是使宿主成为一个局限转导子,对?噬菌体没有免疫性。 温和噬菌体感染受体菌后,其DNA会开环,以线状形式整合到宿主染色体的特定位点上,从而使宿主细胞发生溶源化,并获得对相同温和噬菌体的免疫性。 当前第103页\共有154页\编于星期四\17点 低频转导(low frequency transduction) 低频转导 裂解物 正常噬菌体 极少量的部分 缺陷噬菌体 (局限转导噬菌体) 转导颗粒 局限转导子 (极少量) 低感染复数 缺陷噬菌体DNA分子在宿主细胞内能够象正常的λDNA分子一样进行复制、包装,提供所需要的裂解功能,形成转导颗粒,但没有正常噬菌体的溶源性和增殖能力,感染受体细胞后,通过DNA整合进宿主染色体而形成稳定的局限转导子。 当前第104页\共有154页\编于星期四\17点 低频转导(low frequency transduction) 当前第105页\共有154页\编于星期四\17点 当用LFT裂解物以高m. o. i 感染E. coli gal–(不发酵半乳糖的营养缺陷型)菌株时,凡是感染有λdgal噬菌体任一细胞,几乎都同时感染有正常的 λ 噬菌体。这时λ 与λdgal同时整合在一个受体菌的核染色体组上,从而使它成为一个双重溶源菌(double lysogen)。当双重溶源菌被紫外线等诱导时,其中的正常λ 噬菌体的基因可补偿λdgal缺失的部分基因功能,因而两种噬菌体就同时获得复制的机会。所以在双重溶源菌中的正常λ 噬菌体被称为助体(或辅助)噬菌体(helper phage)。 B 高频转导(HFT,high frequency transduction) 当前第106页\共有154页\编于星期四\17点 双重溶源菌的裂解物中含有等量的λ 和λdgal粒子,称为HFT
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