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5种鼠尾草属植物的耐湿热性研究
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陈 云,周翔宇,肖汉文,朱军杰,黄卫昌,彭东辉
(1.福建农林大学 园林学院,福建 福州 350002;2.上海辰山植物园 城市园艺技术研发与推广中心,上海 201602)
鼠尾草属(Salvia)是唇形科(Lamiaceae)中最大的属,约有1 000种[1],该属植物以富含多种芳香成分而著称,其含有的多种活性次生代谢产物在药物、食品、化妆品领域均有广泛的应用[2],且该属植物颜色丰富、品种繁多、花期长,具有芳香气味,有极高的观赏价值[3]。鼠尾草属植物主要分布于北半球的温带、亚热带和南半球的亚热带高海拔地区[4-5]。我国长江以南,如上海地区,夏季多出现高温高湿天气,最高温度可达40 ℃以上,7-8月的平均相对湿度高达90%[6],对许多鼠尾草属植物的生长造成严重影响,已经成为其应用的主要限制因子。
根据前期观察,引种至上海地区的许多鼠尾草在高温高湿环境下出现生长不良的症状,甚至死亡。龚萍等[7]利用电导率法对苹果鼠尾草(Salviaofficinalis)进行了耐热性测定;冯时等[8]测定了8种中国原产鼠尾草的半致死温度(LT50)和叶绿素相对含量,比较其耐热性差异,从而对其在引种地的高温适应性做出评价。然而,鼠尾草属植物在耐湿热性相关方面的研究尚未见报道。因此,本研究选取观赏价值较高且未能广泛应用的5种鼠尾草属植物为试验材料,分析在高温高湿环境下各鼠尾草的形态变化、叶绿素相对含量(SPAD)、细胞质膜透性、超氧化物歧化酶(SOD)活性、可溶性蛋白含量、丙二醛(MDA)含量以及游离脯氨酸(Pro)含量的变化,比较其对高温高湿环境的耐受性差异及生理机制,为今后耐高温高湿鼠尾草的选育、应用和栽培管理提供参考。
1 材料与方法
1.1 材料
选取上海辰山植物园资源圃内的马德雷鼠尾草(Salviamadrensis)、腺毛鼠尾草(Salviaviscosa)、紫红鼠尾草(Salviaiodantha)、总苞鼠尾草(Salviainvolucrata‘Bethellii’)、‘山顶公园’药用鼠尾草(Salviaofficinalis‘Berggarten’) 5种鼠尾草属植物。研究材料为扦插苗,成活后移植营养钵中进行统一管理,待植株高15~20 cm后选择生长状况良好、长势一致的植株,移至人工气候箱进行耐湿热试验处理。
1.2 试验处理
在人工气候箱(上海一恒科学仪器有限公司)中进行温度35 ℃、光强66%的热激处理,处理时间为12 h,然后进行高温高湿处理,根据上海市气候温度设置为白天40 ℃/12 h,夜晚35 ℃/12 h,空气湿度90%~95%,土壤湿度95%~100%,白天光照强度66%,夜晚进行遮光处理;对照植株置于室温(昼25 ℃/12 h,夜22 ℃/12 h)生长。试验处理0 d(对照组)、2、4、6、8 d于10:00-10:30观察每株受伤害情况(叶片受伤情况、黄叶数、黄叶植株数),并选取从顶部数第3~5片完全展开的成熟叶片,一部分用于叶绿素相对含量和细胞质膜透性的测定,其余部分用锡箔纸包好,迅速放入液氮中冷冻并贮藏于超低温(-80 ℃)冰箱中,用于超氧化物歧化酶活性、可溶性蛋白含量、丙二醛含量和游离脯氨酸含量的测定。每个种类每个时间点重复3次取样,每次重复3株。
1.3 测定方法
1.3.1 形态学指标测定方法 将高温高湿伤害程度划分为以下5级:1级,生长旺盛,叶色鲜亮,无湿热伤害症状;2级,少于1/3的叶片表现湿热伤害症状(叶色变暗、发黄、枯萎掉落等);3级,1/3~2/3的叶片表现湿热伤害症状;4级,2/3以上的叶片表现湿热伤害症状;5级,植株死亡[9-10]。
1.3.2 叶绿素相对含量的测定 参照苍晶等[11]的方法,使用植物营养测定仪(浙江托普仪器有限公司)测定每种植物叶片的叶绿素相对含量。每种鼠尾草随机选取3株,每株选取3片叶,每叶片重复3次。
1.3.3 细胞质膜透性的测定 参照苍晶等[11]的实验教程,用去离子水冲洗叶片2次,吸干叶片表面的水分后,用直径为6 mm的打孔器避开叶脉随机打取3个叶圆片,放入盛有10 mL去离子水(电导率小于0.1 μs·cm-1)的试管中,在真空干燥器中用真空泵抽气1 h,使叶圆片沉入水中。室温静置20 min后,用电导率仪(上海仪电科学仪器股份有限公司)测定电导值S1,再放入沸水浴中15 min,杀死植物组织,取出冷却后在室温下测定电导值S2,计算叶片的相对电导率,计算公式为
相对电导率=S1/S2×100%
(1)
1.3.4 叶片生理生化指标的测定 可溶性蛋白含量的测定参考苍晶等[11]的实验原理和技术,超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、游离脯氨酸含量的测定参照生工生物工程(上海)股份有限公司提供的试剂
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