8个灵芝菌株农艺性状、产量及有效成分比较分析.docxVIP

? ? 8个灵芝菌株农艺性状、产量及有效成分比较分析* ? ? 盛立柱，谢良明，叶晓菊，何建芬，廖加贵，文冬华，林火松 （1.龙泉市食药用菌产业办公室，浙江 龙泉 323700；2.龙泉市张良明菌种场，浙江 龙泉 323700；3.龙泉市丽佳食用菌菌棒专业合作社，浙江 龙泉 323700） 灵芝（Ganoderma lingzhi）俗称灵芝草、仙草、瑞草等[1]，隶属于真菌门（Mycobionta） 担子菌纲（Ba sidiomycetes） 多孔菌目 （Polyporales） 灵芝科（Ganodermataceae） 灵芝属（Ganoderma）。灵芝是著名的食（药）用真菌，药用历史已有2 000多年，因具有多种药用价值而被历代医药学家视为滋补壮体、扶正固本的神奇珍品[2]。 我国灵芝栽培主要有2种模式，一种是段木灵芝栽培，另一种是代料灵芝栽培，目前以段木栽培为主，产地主要有浙江、安徽、福建、东北、四川、贵州等地[3]。段木灵芝栽培需要消耗大量的木材，且生长周期较长，耗时耗力，栽培过程需要覆土，随着栽培年限的积累，土壤栽培环境不断变化，灵芝栽培出现连作障碍，因此段木灵芝栽培需要每2年更换一次栽培场地，无形中增加了生产成本。灵芝代料栽培主要分布在华北地区，其模式已经十分普遍，但总体上我国灵芝的代料栽培多数采用分散式、手工式栽培模式，各地区生产水平不同，生产方式粗放，设施相对简陋，生产规模小，品质参差不齐，经济效益低[4]。 灵芝的药用价值来自其孢子粉，近年来研究表明灵芝的主要生理活性成分有灵芝多糖、三萜类化合物、蛋白质、多肽、核苷类、呋喃类、甾醇、生物碱和氨基酸等，而灵芝多糖和三萜类化合物是灵芝孢子粉的重要有效成分[5]，不同灵芝品种中灵芝多糖和三萜含量不同，相同品种在不同栽培基质中的灵芝多糖和三萜含量差异较大[6]。因此灵芝孢子粉的产量以及孢子粉中多糖和三萜类化合物的含量成为评价灵芝品种优劣的重要指标[7]。 随着大健康产业的不断发展，灵芝栽培技术的不断提升，以及对灵芝产品更深层次的开发利用，消费者对灵芝功效的认可度也逐渐提升，需求量日益增加。传统的分散式、手工式栽培模式已经无法满足市场的需求，故灵芝工厂化栽培是灵芝产业发展的新方向。灵芝工厂化栽培采用代料栽培模式，根据灵芝的适宜生长条件，采用数字化智能系统实时监测和调控栽培环境条件，大批量、多批次地生产灵芝。避免灵芝栽培受季节、环境因素的影响，解决重金属残留、灵芝栽培连作障碍等问题。合理利用森林资源，满足更大的市场需求，实现全年无间歇、高品质、高产能的灵芝生产。因此，通过试验筛选出适宜的灵芝代料栽培菌株品种，为灵芝工厂化栽培提供优势菌株。 1 材料与方法 1.1 试验材料 供试菌株：美芝、韩芝、日芝、角芝、泰山、113、X16、沪农1号共8个菌株，均来自龙泉市张良明菌种场。 菌袋：原种和栽培种菌袋为15 cm×29 cm×0.05 cm聚乙烯菌袋，生产菌袋为18 cm×42 cm×0.05 cm的聚乙烯菌袋。 PDA试管培养基配方：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂粉20 g，水定容至1 L。 原种和栽培种培养料配方：木屑80%、棉籽壳10%、麸皮8.5%、石膏粉1%、红糖0.5%，水60%～65%。 生产栽培配方：木屑88.5%、麸皮10%、石膏粉1%、红糖0.5%，水60%～65%，每袋干重0.7 kg～0.8 kg。 栽培场所：标准化钢架养菌大棚。 试验仪器：SE602FZH分析天平，奥豪斯国际贸易上海有限公司；UV1102Ⅱ759分光光度计，上海天美科学仪器有限公司；DK-S24电热水浴锅，上海森信试验仪器有限公司；JY92-IIN超声仪，宁波新芝生物科技股份有限公司；VELOCITY 14R离心机，广州硕谱生物科技有限公司。 1.2 试验方法 1.2.1 母种的制备 制作PDA试管培养基50支，121℃高压灭菌30 min后制成试管斜面。随机抽取5支灭菌后的试管，放入恒温培养箱内25℃空培养48 h，观察试管是否有杂菌污染，未污染方可使用。每个供试菌株在无菌环境下各接种3支试管，标记好标签，放入恒温培养箱内25℃培养，随时观察菌丝体颜色变化情况，及时观察杂菌污染情况。待菌丝长到试管斜面2/3，转接原种。 1.2.2 原种的制备 将配制好的原种培养料装入原种菌袋内，封口后121℃高压灭菌，待温度升至121℃后保温2.5 h，冷却降温至约28℃进行接种。挑选菌丝体洁白浓密的母种试管，每支供试菌株的母种试管分别挑取直径为0.5 cm的菌块，分别接种到4个原种菌袋，标记好标签，于25℃室内层架培养，待原种长满菌袋后，方可接种栽培种。 1.2.3 栽培种的制备 将配制好的栽培种培养料装入栽培种菌袋内，封口后于121℃高压灭菌，待温度升至121℃后保温2.5 h