不同储存方式和发酵时间对茅台酒糟常规营养成分含量、发酵品质和微生物多样性的影响.docxVIP

? ? 不同储存方式和发酵时间对茅台酒糟常规营养成分含量、发酵品质和微生物多样性的影响 ? ? 樊雪莹 成启明 陈玉连 李 平 龙见华 李茂雅 陈 超 (贵州大学动物科学学院，贵阳 550000) 近年来，随着农业供给侧结构性改革的推进，以牛、羊为主的草食畜牧业比例逐步提高。畜牧业的发展带动了饲草产业发展，饲草多样化供给的态势日益突出，饲草需求面临新的挑战[1]。随着我国畜牧业的快速发展，饲料用粮的供需矛盾也日益突出，发展节粮型畜牧业，开辟非常规饲料资源，调整饲料生产结构，提高饲料资源利用率，已成为我国畜牧业发展的必然趋势。因此，新型优质饲草的研究与应用对未来畜牧业的健康可持续发展具有极为重要的意义。 酒糟是一类数量较大、来源较集中和稳定的非常规饲料资源[2]。研究发现，白酒与酒糟产量比为1∶3，2019年，贵州省规模以上白酒企业白酒产量总计27.39万t，酒糟产量已高达90万t，据茅台公司数据显示，2020年茅台系列基酒产量约为5.02万t[3]，酒糟废弃量可达15万t，造成较大的资源浪费和环境污染。茅台酒糟作为酱香型酒糟的代表，其营养成分丰富，水分、粗蛋白质(crude protein，CP)、淀粉、粗脂肪(ether extract，EE)、粗纤维、粗灰分及无氮浸出物的含量分别为58.46%、13.28%、6.77%、2.51%、7.12%、3.24%和15.38%，可作为优质饲料饲喂家畜[4]。另外，酒糟是经发酵高温蒸煮形成的，因此粗纤维含量较低[5]，具有较好的适口性和易消化的特点，而且在一定程度上可以有效预防牛发生瘤胃鼓气的现象。但是酒糟的产量很大，而且湿酒糟水分含量很高，保存困难[6]。因此大量研究者对酒糟饲料合理保存开展研究。王鸿泽等[7]将酒糟与甘薯蔓、稻草混合青贮，研究发现添加适量酒糟可以较好地保存青贮饲料营养品质，有效提高青贮发酵品质。原现军等[8]研究表明，添加青稞酒糟可以提高青稞秸秆和高羊茅混合青贮饲料的发酵品质，以添加20%青稞酒糟为宜。以上研究表明，发酵是保存酒糟的最佳方法，但是目前关于适合酒糟发酵的储存方式的研究还未见报道。 目前，关于茅台酒糟饲料化利用的研究较少。因此，本试验旨在研究不同储存方式和发酵时间对茅台酒糟常规营养成分、发酵品质和微生物多样性的影响，筛选出茅台酒糟适宜的储存方式和发酵时间，旨在为茅台酒糟饲料化利用提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料 茅台酒糟取自贵州省遵义市茅台镇茅台集团。鲜酒糟原料营养成分如表1所示，鲜酒糟干物质(dry matter，DM)含量较高，为48.29%；CP含量为21.917%；中性洗涤纤维(neutral detergent fiber，NDF)、酸性洗涤纤维(acid detergent fiber，ADF)含量分别为35.793%、23.580%；可溶性碳水化合物(water soluble carbohydrates，WSC)含量为3.814%。 表1 鲜酒糟原料营养成分 1.2 试验设计 试验于2020年8月12日在关岭月亮湾牛场进行，将97%茅台酒糟+2%玉米麦麸+1%发酵剂(主要成分为乳酸菌、酵母菌、芽孢杆菌、双歧杆菌、丁酸梭菌、淀粉酶、蛋白酶、纤维酶和脂肪酶)用大型搅拌机混合均匀，按照储存方式设置4个处理，即青贮窖(J)、自制真空发酵(Z)、吨包发酵(D)和罐装发酵(G)，压实密封，创造无氧环境，每个处理装填5 t，设置3个重复，每次随机取样，减少环境影响和误差。以鲜酒糟为对照(CK)处理，所有处理在25 ℃环境下发酵，分别在发酵7、14和30 d时取样分析。 1.3 测定指标及方法 分别在发酵7、14和30 d时，取样测定酒糟常规营养成分、发酵品质和微生物多样性。 1.3.1 常规营养成分测定 采用烘干法[9]测定DM含量，采用蒽酮比色法[10]测定WSC含量，采用凯氏定氮法[11]测定CP含量，使用Ankom 220型纤维分析系统[12]测定ADF和NDF含量。 1.3.2 发酵品质测定 利用四分法随机取10 g样品，加入90 mL无菌生理盐水，摇床以2 000 r/min振荡摇晃24 h后，用4层纱布过滤得到浸提液，用于pH、氨态氮(ammonia nitrogen，NH3-N)和有机酸含量的测定。使用pH计测定pH，采用苯酚-次氯酸比色法[13]测定NH3-N含量，采用高效液相色谱法测定乳酸(lactic acid，LA)、乙酸(acetic acid，AA)、丙酸(propionic acid，PA)和丁酸(butyric acid，BA)含量[11]。 1.3.3 微生物多样性测定 根据Blaxter等[14]提取DNA方法，将每个处理青贮样品的3个重复充分混合均匀，取10 g采用HiPure Soil D