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超高压提取香菇多糖工艺研究 蘑菇又名香梨和厚蘑菇，是一种重要的食药性材料。它分布在中国、日本、朝鲜、越南和其他国家。它被称为“蘑菇皇后”。香菇具有良好的保健功能和较高的药用价值, 可以预防和治疗多种疾病 超高压技术是近年来发展较快的一种新型的加工技术, 具有操作简单、提取率高、时间短、杂质含量少、能耗低、环保等优点。它不仅可以有效地杀灭食品中的微生物, 而且还能保持食品天然色、香、味和营养成分 1 材料和方法 1.1 材料和试剂 干香菇 (市购) , 浓硫酸 (广州市东红化工厂) , 苯酚 (天津市化学试剂一厂) 1.2 紫外可见分光光度计 UHP900-2﹡2 (Ⅱ) 超高压处理机 (中国兵器科学研究院) , 752紫外可见分光光度计 (上海精密科学仪器有限公司) , BS110S精密电子天平 (北京赛多利斯天平有限公司) 。 1.3 实验方法 1.3.1 样品预处理 1.3.2 分光光度法测定总多糖含量 精确称取样品4 g, 准确加入一定量的溶剂, 密封混匀, 按预先设计的参数处理, 4000 r/min离心10 min, 取一定体积上清液定容, 用分光光度法测量吸光度A值, 计算多糖得率。 1.3.3 关于蘑菇葡萄糖的测定 1.3.3. 苯酚空白实验 精确称取105℃干燥恒重的葡萄糖100 mg, 配成1 mg/m L标准溶液, 准确吸取标准溶液, 各加2.0 m L的蒸馏水, 再各加5%的苯酚1.0 m L, 摇匀, 迅速滴加浓硫酸5.0 m L, 摇匀, 置25℃水浴锅中恒温30 min, 于490 nm下测定其吸光度, 以水作空白实验。以吸光值为横坐标, 以多糖的微克数为纵坐标, 绘制标准曲线, 计算回归方程为:C=0.1324 A+0.0043。 1.3.3. 2.样品中葡萄糖含量的测定 吸取样品液1.0 m L, 按上述步骤操作, 测吸光值, 按回归方程求出样品溶液中多糖含量。 2 结果与分析 2.1 单因素实验 2.1.1 多糖含量测定 精确称取4 g香菇样品, 分别按固液比1:30准确加入蒸馏水120 m L, 密封混匀, 加压100、200、300、400、500、600 MPa, 保压时间6 min, 温度50℃, 抽滤取滤液, 计算多糖得率。从结果可以看出, 随着压力的增加, 多糖得率逐渐升高, 压力大于300 MPa后增幅减缓。 2.1.2 超高压提取法提取多糖 精确称取4 g香菇样品, 分别固液比 (m L/g) 1:10、1:20、1:30、1:40、1:50准确加入蒸馏水进行超高压提取, 加压300 MPa, 温度50℃, 提取6 min, 抽滤取滤液, 计算多糖得率, 结果如图所示, 可以看出类似于普通热水抽提法 2.1.3 超高压处理 精确称取4 g香菇样品, 分别在30℃、40℃、50℃、60℃、70℃条件下进行超高压处理。压力300 MPa, 固液比1:30, 保压时间分别为6 min, 抽滤取滤液, 计算多糖得率。结果如图3所示, 多糖得率随温度的升高总体成上升趋势, 温度达到50℃时, 多糖的提取率基本不变。 2.1.4 不同保压时间对多糖得率影响 精确称取4 g香菇样品, 分别按固液比1:30准确加入蒸馏水120 m L, 密封混匀, 高压提取。压力300MPa, 温度50℃, 保压时间分别为2 min、4 min、6min、8 min、10 min、12 min, 抽滤取滤液, 测量多糖得率。结果如图4所示, 从图中可以看出保压时间的延长对多糖提取的促进效果并不明显, 特别是保压时间为4 min后, 因此, 正交实验时, 固定保压时间为4 min。 2.2 正交优化试验 2.2.1 优化工艺 在单因素试验的基础上, 按照尽量减少试验次数和寻求设计最优的原则, 选择提取固液比 (A) 、温度 (B和压力 (C) 进行条件优化, 固定保压时间为4 min。选用正交设计表如表1。 2.2.2 最佳配比的确定 由表2分析可知, 对多糖得率影响最大的是温度, 影响最小的是固液比, 各因素的影响大小顺序是BCA，极差分析结果得到的最佳组合是 A3B3C3，即：固液比 1:35，温度 55 ℃，压力 350 MPa，在此条件下做验证实验可得香菇多糖得率为：8.96%。 2.3 不同超声酶法提取率的比较 对不同方法提取香菇多糖进行了对比研究, 结果见表3。从表3可知, 采用超高压提取法的提取率最高, 为8.96%, 是热水浸提提取率的2.23倍, 比超声波酶法浸解法提取率高出48.83%。 3 结论 3.1 通过压力、压力、压力时间、固液体比等单因素试验，正交优化，得出结论。影响蘑菇糖的得到率的顺序是温度-压力-固液体比。当压力为350mpa，固液体比为1:35，温度为55时，脾脏葡萄糖