基因Ⅳ型猪戊型肝炎病毒重组ORF3蛋白的表达、纯化及初步应用研究的开题报告.docxVIP

基因Ⅳ型猪戊型肝炎病毒重组ORF3蛋白的表达、纯化及初步应用研究的开题报告 摘要： 猪戊型肝炎病毒（HEV）是一种造成猪的重要疾病，在人群中也被发现是一种常见的肝炎病原体。ORF3蛋白是HEV的一个非结构蛋白，对HEV的包膜形成和病毒感染有重要作用。本研究利用基因工程技术，构建了一种包含基因Ⅳ型HEV ORF3蛋白的表达载体，并成功在大肠杆菌中表达、纯化了重组ORF3蛋白。同时，初步探讨了重组ORF3蛋白在HEV感染的免疫诊断中的应用价值。 研究内容和方法： 1. 利用PCR扩增基因Ⅳ型HEV ORF3基因并进行定向克隆，构建包含N端His标签和TEV酶切位点的表达载体。 2. 利用大肠杆菌表达系统表达重组ORF3蛋白，并采用亲和层析纯化技术纯化目的蛋白。 3. 利用Western blot、抗原竞争ELISA等方法进行初步鉴定和应用研究。 预期结果： 1. 成功构建基因Ⅳ型HEV ORF3蛋白的表达、纯化系统，并获得高纯度的目的蛋白。 2. 初步探索了重组ORF3蛋白在HEV感染的免疫诊断中的应用价值。 意义： 通过本项研究，不但可以加深对HEV感染、病毒结构以及病毒感染机制等方面的认识，同时还为HEV感染的早期诊断和疫苗研发提供了理论和实验基础。