NY_T 3626-2020CN西瓜抗枯萎病鉴定技术规程.pdf

ICS_65.020.01B 15NY中华人民共和国农业行业标准NY/T3626—2020西瓜抗枯萎病鉴定技术规程Technical code of practice for evaluation of watermelonresistancetoFusariumwilt2020-07-27发布2020-11-01实施中华人民共和国农业农村部发布 NY/T 3626—2020中华人民共和国农业行业标准西瓜抗枯萎病鉴定技术规程NY/T 3626—2020***中国农业出版社出版（北京市朝阳区麦子店街18号楼）（邮政编码：100125网址：www,)北京印刷一厂印刷新华书店北京发行所发行各地新华书店经销*开本 880mmX1230mm1/16印张0.75字数15千字2020年10月第1版2020年10月北京第1次印别书号：16109·8211定价：18.00元版权专有侵权必究NY/T3626—2020举报电话：（010 NY/T 3626—2020前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由农业农村部种植业管理司提出并归口。本标准起草单位：中国农业科学院郑州果树研究所。本标准主要起草人：吴会杰、古勤生、彭斌、康保瑞、刘丽峰， NY/T 3626—2020西瓜抗枯菱病鉴定技术规程1范围本标准规定了西瓜对枯萎病(参见附录A)的抗病性评价方法。本标准适用于西瓜抗枯萎病室内苗期抗病性签定，2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仪注日期的版本适用于本文件，凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单)遇用于本文件。NY/T1857.3黄瓜抗枯萎病鉴定技术规程。3术语和定义NY/T1857.3界定的术语和定义适用于本文件4原理通过人工接种方法将病原菌接种至西瓜苗根部，调查发病情况，根据发病率的高低评判其抗病性水平，5材料与方法5.1材料5.1.1病原菌尖孢镶抱菌西瓜专化型（Fusariumoxysporumf.sp.niseumt，Fon)1号生理小种。5.1.2品种抗病对熙品种卡红，感病对照品种蛋宝，待整定晶种。对照材料可从国家西瓜甜瓜中期库(河南郑州）获得。5.1.3培养基马铃薯萄萄糖琼脂培养基（PDA)、马铃薯葡萄糖培养液(PDB)、凌数沙培养基。5.1.4其他材料培养皿（直径大小为90mm）、250mL三角瓶、试管、锻子、酒精灯、脱脂棉、育苗盘等实验耗材；恒温培养箱、超净工作台、高压灭菌锅、冰箱、可控温温室（温度保持在25C30℃）、微波炉、电避炉等实验仪器。5.2方法5.2.1PDA培养基制备称取洗净去皮的马铃薯200g，切成小块，加水1000mL煮沸0.5h，纱布过滤，加人踪脂粉15g，加热底化后，再加人葡葡糖15g，搅拌均匀并游解后，加自来水至总体积为1000mL，分装于250mL三角瓶，121℃0.1MPa灭菌20min，随后侧人90mm墙养ⅢL备用。5.2.2PDB培养液制备PDA培养基(5.2.1)中不加入琼脂粉，其他成分都相同的培养基为PDB培养液，5.2.3麦粒沙培养基制备脱壳后的麦粒（从普通超市购买），沙粒粒径大小为1mm～3mm。煮熟的麦粒与沙粒按质量比1：2混匀，装人250mL三角瓶或广口瓶，占瓶体积的1/3，121℃0.1MPa灭菌30min，现用现配。- NY/T3626—20205.2.4病原菌扩需取保存在一80C的西瓜枯姜病菌（尖孢镖孢菌西瓜专化型1号生理小种），用PDA培养基28℃复苏2d，待菌落长出后再转接到新的PDA培养基上生长，培养7d～10d备用。5.2.5伤根接种法孢子悬浮液的制备取生长旺盛的西瓜枯萎病菌菌丝，接种于PDB液体培养基中，在28℃C据床里抵荡培养7d～10d后，将振荡培养后的菌液用双层纱布过滤，去掉菌丝，滤液以3000/min离心，去除上清液，用无菌水重悬，用血球计数板统计病原菌孢子的数目，调至孢子悬浮液浓度为每毫升1×10*个孢子，现用现配。5.2.6整定材料育苗用47%春雷莓索·王铜可湿性粉剂按1000倍加人55℃温水中浸种6h，用干净的湿够布包好，置于28℃催芽，待种子胚根长至0.5cm、85%的种子露自后摄种，播种时，将种子轻轻收人培养体或育苗盘，履盖潮土1cm，温度控制在25℃~30C。5.2.7土壤或基质接种法采用PDA培养基紫殖病菌，再用凌粒沙培养基扩大培养，制备菌土，需要签定的品种直接播种于菌土中，同时播种对照品种。5.2.8伤根接种法取3叶或4叶期生长状态一致、健壮的西瓜幼苗，用清水冲洗根部的土壤，在取苗和冲洗过程中会在根部造成伤口，将冲洗干净带伤口的幼苗根部没泡于浓度为每毫升1×10°个孢子的病原菌魂子悬浮液中10min~15min，处理后的瓜苗定植于育苗钵内