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核酸检测培训 第一页，共三十九页，2022年，8月28日 主要内容 为什么要做核酸检测？ 核酸是什么？ 怎样进行核酸检测？ 市场状况 第二页，共三十九页，2022年，8月28日 为什么要做核酸检测？ 第三页，共三十九页，2022年，8月28日 核酸检测（基因检测） 现知人类的疾病都与基因有直接或间接 的关系。医学实验室所要检测和分析的核酸 既包括人体本身的基因(DNA ) 以及反映基因 转录水平的mRNA , 也包括侵入人体的致病 微生物等所携带的外源性基因(DNA/RNA )。 第四页，共三十九页，2022年，8月28日 传统检测试剂（酶免ELISA） 技术特点： 检测目标为蛋白, 所检测的主要是疾病所引发的人体抗体而不是病原体本身,是一种间接、滞后的检测方式。易操作，成本低。 固有不足： 不能够消除对“窗口期”标本(抗体阴性,核酸阳性)的漏检 难于检测病原体的不同亚型及突变型 不典型血清阳转 对免疫逃避或免疫沉寂的标本产生漏检 第五页，共三十九页，2022年，8月28日 核酸检测 显著缩短窗口期:HIV窗口期缩短45%，HCV缩 短89%，HBV缩短50%。 提 高 灵 敏 度:理论上扩增体系中单拷贝的模板 也能被检测出。 特 异 性 好:使用荧光探针技术的PCR检测， 几乎没有方法学的假阳性。 直接揭示病原体的存在 对操作者及检测环境的要求较高 检测成本相对较高 第六页，共三十九页，2022年，8月28日 输血中可传染病原体的“窗口期” 病毒种类 ELISA检测项目 窗口期 HCV 抗-HCV 2.0/3.0 EIA 8-10周 HIV 抗-HIV-1/2 EIA and HIV-1 抗原 EIA 2-4周 HBV HBVsAg EIA and HBVcAg EIA 6-8周 HTLV 抗-HTLV I/II EIA 8-10周 CMV 抗-CMV EIA 3-5 周 第七页，共三十九页，2022年，8月28日 窗口期检测率 国家或地区 HBV HCV HIV 加拿大 1:153000 (~1/15万) 1:2300000 (~1/230万) 1:7800000 (~1/780万) 法国 1:640000 (~1/64万) 1(~1/1000万) 1:3150000 (~1/315万) 德国 1:230000 (~1/23万) 1:670000 (~1/67万) 1:2770000 (~1/277万) 日本（50混） 1:51988 (~1/5.2万) 1:348091 (~1/35万) 1:2668696 (~1/267万) 美国（24混） 1:180000 (~1/18万) 1:230000 (~1/23万) 12(~1/309万) 香港 1:32786 (~1/3.3万) 1:5456 (~1/0.5万) 1:222 (~1/0.02万) 第八页，共三十九页，2022年，8月28日 核酸检测在临床诊断中的应用 定性诊断 血液筛查 病原体筛查诊断 SNP和耐药突变诊断 基因型分型 遗传病诊断 个体用药诊断 基因鉴定和配型 …………… 定量检测 病情的评估和预后判断 抗病毒药物疗效的观察 新药验证 癌基因表达差异 …………… 第九页，共三十九页，2022年，8月28日 核 酸 是 什 么？ 第十页，共三十九页，2022年，8月28日 核酸（Nucleic Acid）是一种主要位于细胞核内的生物大分子，其充当着生物体遗传信息的携带和传递。核酸广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内。 现已发现近2000种遗传性疾病都和DNA结构有关。肿瘤的发生、病毒的感染、射线对机体的作用等都与核酸有关。 第十一页，共三十九页，2022年，8月28日 核酸分类：DNA、RNA； DNA：dATP（A）、dTTP（T）、 dCTP（C）、dGTP（G）； RNA：ATP、UTP、CTP、GTP； 3’?5’磷酸键 第十二页，共三十九页，2022年，8月28日 DNA结构 单链DNA形成双链的原则— 碱基互补配对： G-C T-A 外部为磷酸和戊糖形成 的骨架 内部为碱基互补形成的 共价结合区域 螺旋结构