WST 50-1996尿中苯酚的气相色谱测定方法 （二）FFAP柱法.pdf

中华人民共和国卫生行业标准尿中苯酚的气相色谱测定方法WS/T50--1996（二）FFAP柱法Urine--Determination of phenol-Gaschromatographic methodI FFAP column1主题内容与适用范围（二)FFAP柱法。本标准规定了尿中酚的气相色谱测定方法本法最低检测浓度为1.5mg/L。本标准适用于正常人和接触苯工人尿中苯酚的测定。2原理尿样加盐酸加热，使结合态的酚水解，乙醚萃取，经FFAP柱将尿中苯酚及人体正常代谢物对甲酚分离。用氢焰离子化检测器检测。以保留时间定性，外标法峰高定量。3仪器3.1气相色谱仪，氢焰离子化检测器。3.2电热恒温水浴。3.3冰壶。3.4容量瓶,10mL,50mL。3.5具塞离心管，10mL。3.6聚乙烯塑料瓶，150mL。3.7尿比重计。4 试剂本法所用试剂除另有说明者外，均为分析纯试剂。实验用水：为经全玻璃蒸馏器蒸馏的水。4.14.2盐酸,P2o=1. 19 g/mL。4.3无水乙醚，用前重蒸。4.4固定相:FFAP(改性的聚乙二醇）。4.5载体:Chromosorb WHP,80～100目。4.6苯酚。4.7苯酚标准溶液：称取苯酚0.0125g溶于少量无水乙醚中，将此溶液定量转移至50mL容量瓶中，用无水乙醚稀释至刻度。此标准溶液1mL=0.25mg苯酚。4.8质控样：用加标的模拟尿、接触者混合尿或加标的正常人混合尿作质控样。1997-05-01实施中华人民共和国卫生部1996-10-14批准 WS/T 50--19965采样、运输和保存用聚乙烯塑料瓶收集班末尿约50mL，尽快测定比重，于室温下运输，但夏季运输需要冷藏，于一8℃下可保存一周。：分析步骤66.1仪器操作条件色谱柱：柱长2.5m，内径3mm，玻璃柱。固定液：载体=10：100。柱温：165℃。汽化室温度：180℃。检测室温度：180℃。载气：氮气，45mL/min。6.2空白试验用模拟尿按6.3条处理、6.5条测定。6.3样品处理取5mL尿样于具塞试管中，加入1mL盐酸，于90℃水浴中加热水解1h。取出放冷，加水稀释至10mL。置冰浴中冷至0℃，加入3mL乙醚，振摇1min萃取，静置分层，将乙醚层补足至体积为3mL，必要时离心。6.4标准曲线的绘制取3只10mL容量瓶，按下表配制标准管。苯酚标准管的配制管号123苯酚标准溶液（4.7)，mL0.61. 22. 09. 48. 88. 0乙醚,mL153050苯酚含量,μg取2uL上述标准管中溶液，进气相色谱仪测试。以苯酚的含量（ng）为横坐标，峰高（mm）为纵坐标，绘制标准曲线。6.5样品测定取2uL经处理的样品乙醚液（6.3），进气相色谱仪测试，见图1。根据测得的苯酚峰高值查标准曲线（6.4），再根据公式（1）、（2)进行计算，得标准比重下的尿酚浓度。 WS/T50-in图1接触者尿酚气相色谱图1苯酚：253.4mg/L;2—对甲酚7 计算7.1按式(1)计算尿样换算成标准比重(1.020)下的浓度校正系数k。1.020 - 1.000K=(1)实测比重－1.0007.2按式(2)计算尿中酚的浓度。_.bX=-(2)Ta式中：X---尿中酚的浓度,mg/L;由标准曲线查得的苯酚含量，ng进样量，μL；a-b——乙醚提取液体积，mL；V尿样体积,mL。8说明8.1本法最低检测浓度为1.5mg/L（取尿样5mL）标准曲线线性范围0~50mg/L，精密度CV=3.3%~5.4%(酚浓度为15~50 μg/mL,n=6)，加标回收率为82.8%~87.0%（尿样本底浓度25.2~116.4μg/mL，加标量34.5~69mg/L，n=2)。8.2一般对正常人取晨尿分析，对接触者取班末尿分析。采样时应注意防止污染。采样后须将塑料瓶盖旋紧，并尽快运输，以避免苯酚的挥发及氧化。8.3影响测定的因素 WS/T50-19968.3.1样品酸解后加入乙醚提取，乙醚在水中有一定的溶解度，并可能有挥发损失，所以提取后须将乙醚层定容。实验过程中，为尽量避免乙醚的挥发损失，应特别注意冷操作，凡接触乙醚的实验器具应预先在冰箱或冰壶中存放。8.3.2本法采用峰高、外标法定量，气相色谱操作条件对测定的影响较大。柱温、载气流速均影响峰高，操作时应注意保持恒定。由于使用外标法定量，进样量的准确性亦是保证本法准确度的一个重要因素。8.4对甲酚为人尿中的正常成分，可与被检物苯酚共存。采用FFAP柱在本法设定的条件下可将苯酚与对甲酚分离，分离度1.25。8.5质控样用加标的模拟尿时，可考察准确度和精确度，用加标的正常人尿或接触者尿时只能考察精密度。人尿不易保存。模拟尿只含人尿的大量成分。附加说明：本标准由卫生部卫生监督司提出。本标准由中国预防医学科学