水质 细菌总数的测定 平皿计数法（征求意见稿）.pdfVIP

目 次 前 言ii 1 适用范围1 2 术语和定义1 3 方法原理1 4 干扰和消除1 5 试剂和材料1 6 仪器和设备2 7 样品2 8 分析步骤3 9 结果计算与表示4 10 精密度和准确度4 11 质量保证和质量控制5 12 废物处理5 i 前 言 为贯彻 《中华人民共和国环境保护法》和 《中华人民共和国水污染防治法》，保护环境， 保障人体健康，规范水中细菌总数的测定方法，制定本标准。 本标准规定了测定地表水、地下水和废水中细菌总数的平皿计数法。 本标准为首次发布。 本标准由环境保护部环境监测司、科技标准司组织制订。 本标准主要起草单位：辽宁省环境监测实验中心。 本标准验证单位：大连市环境监测中心、丹东市环境监测中心站、锦州市环境监测中心 站、辽阳市环境监测站、沈阳市疾病预防控制中心、辽宁北方环境检测技术有限公司。 本标准环境保护部201□年□□月□□日批准。 本标准自201□年□□月□□日起实施。 本标准由环境保护部解释。 ii 水质 细菌总数的测定 平皿计数法 1 适用范围 本标准规定了测定水中细菌总数的平皿计数法。 本标准适用于地表水、地下水和废水中细菌总数的测定。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 2.1 细菌总数 total bacteria 36℃培养48h，1ml 水样在营养琼脂上所生长的需氧菌、兼性厌氧菌和异养菌菌落总数。 2.2 菌落形成单位 Colony-Forming Units, CFU 单位体积中的细菌群落总数。 3 方法原理 细菌能以单独个体、成双成对、链状、成簇等形式存在，而且没有任何一种培养基能够 满足一个水样中所有细菌的生理要求。据此特性，通过将水样接种于营养琼脂培养基中，在 特定的物理条件下 （36℃培养48h）所生长的细菌菌落的总数作为测定水中需氧菌、兼性厌 氧菌和异养菌等细菌总数。 4 干扰和消除 氯具有氧化性，较高浓度的重金属离子具有毒性，它们都能破坏微生物细胞内酶的活性， 最终导致细胞死亡。可分别加入硫代硫酸钠和乙二胺四乙酸二钠排除氯或重金属的干扰。 5 试剂和材料 除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂。 5.1 营养琼脂培养基 成分： 蛋白胨 10g 1 牛肉膏 3g 氯化钠 5g 琼脂 15g～20g 制法：将上述成分或含有上述成分的市售成品溶解于1000ml蒸馏水或去离子水中，调节 pH值到7.4～7.6，分装于玻璃容器中，经121℃高压蒸汽灭菌20min，储存于冷暗处备用。 5.2 无菌水：新制备的蒸馏水或去离子水经121℃高压蒸汽灭菌20min，备用。 5.3 硫代硫酸钠 （Na S O •5H O）。 2 2 3 2 5.4 乙二胺四乙酸二钠 （C H N O Na •2H O）。 10 14 2 8 2 2  5.5 硫代硫酸钠溶液： （Na S O •5H O） 0.10g/ml 2 2 3 2 称取硫代硫酸钠10g，溶于适量蒸馏水或去离子水中，定容至100ml，现配。  5.6 乙