二氧化碳减排技术在微藻培养中的应用.docxVIP

二氧化碳减排技术在微藻培养中的应用 工业活动导致co含量的迅速增加。同时，高昂的温室效应也是全世界必须面临的危机。微藻所具有的独特生理特性为有效吸收CO2、解决温室气体难题提供了契机。作为一类具有极高光合效率的单细胞微生物,微藻不仅能够通过光合作用高效吸收CO2,而且可将其转化为蛋白质、油脂、多糖等多种生物活性物质成分,由此可望构建具有良好社会经济效益的新型减排技术。 20世纪90年代初以来,螺旋藻已成为全球范围内产业开发最为成功的微藻。螺旋藻所展示的规模化产业、广泛有效的应用价值以及罕有的生理特性为建立CO2产业化减排技术提供了绝好的发展空间。然而,由于螺旋藻产业化生产仍采用简易低成本的开放池培养模式,所通入补充的CO2气体将会大量逸出和浪费,因此必须建立简易低成本的防逸装置,才能促进CO2减排技术的发展。 尽管与淡水养殖螺旋相比,海水养殖螺旋藻可显著提高其品质,而且能节约大量的淡水资源,但目前螺旋藻的养殖还是以淡水养殖为主,主要原因是海水螺旋藻养殖的生产成本高。本实验室自20世纪80年代末至90年代初在国际上率先建立了全海水的螺旋藻产业化生产技术,但由于在培养过程中,高的pH生长环境使得无机碳源易与海水中的钙镁离子生成沉淀,大幅度增加了碳源成本,从而限制了其产业化的进一步推广。 由于CO2的碳含量是小苏打(NaHCO3)的1.83倍,而且成本只有小苏打的一半左右,以CO2取代小苏打做为碳源能很好降低螺旋藻的生产成本。不仅如此,以补充CO2为碳源能有效的控制藻液的pH,有效减少海水钙镁沉淀的生成,这无疑也将大幅度降低海水螺旋藻的生产成本。如何通过控制CO2补充量以避免培养物的快速酸化所导致细胞的损伤,以及如何防止培养物中CO2的逸出泄露,是目前国际上高度关注并亟需解决的技术关键。 本文结合微藻的pH漂移原理以及耐高碱的特性建立了耦合CO2减排的开放池培养应用技术,并将该技术初步应用于螺旋藻产业化培养,以解决螺旋藻培养成本过高的问题,为有效降低螺旋藻养殖成本、有力推进微藻低碳产业发展奠定基础。 1 材料和方法 1.1 海藻的筛选 实验藻种为钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)和嗜碱绿球藻(Chlorococcum alkaliphilus,暂定名)MC-1株系。螺旋藻的全海水中试培养所用藻种为钝顶螺旋藻HS331藻株,该藻株为一新藻株,于2007年从三亚海王海洋生物科技有限公司(简称三亚海王公司)的海水螺旋藻养殖基地中筛选而得。MC-1由本实验室于2002年从室外蓝藻培养物中分离纯化而得。 1.2 培养基和材料 MC-1实验室内的培养采用向文洲等的方法进行培养。 HS331海水螺旋藻中试培养采用修改后的南海-II号培养基进行培养,培养基采用100%自然海水配置,在300 m2的跑道池进行,所用海水从试验基地附近海域抽取,通过覆盖颗粒活性炭的砂滤池过滤。跑道池培养中的叶轮搅拌转速为13 r/min,藻液流速为0.3 m/s;培养物深度保持在20 cm左右。螺旋藻产业化生产采用含10%-30%自然海水的培养基,补充70%-90%的自来水培养,扩种时培养基含1-2 g/L小苏打,其它培养基成分与HS331的一致。 CO2补充方法及减排技术:采用纯度为99.99%的食品级瓶装CO2,液态CO2经减压、气化后通入培养池底,经带微气孔的气石进入培养物。为防止CO2气体从培养物逸出泄露,在气头上方的培养物液面悬置一方形或长方形玻璃/铁皮箱结构的防逸罩,开口朝下,使补充后外逸的CO2汇集于气罩中。防逸罩的表面积随单个培养设施的面积不同而不同,水族箱为1.0 cm2-2.0 cm2,300 m2跑道池为1.5 m2,2500 m2跑道池为3.0 m2。 1.3 海藻细胞的培养 户外螺旋藻生物量的测定采用干重法,记录每天的生物量浓度(g/L),产率按照下列公式计算: 其中ΔC表示螺旋藻细胞生物量浓度(g/L)的日变化量,h(cm)表示藻池中培养液的深度。 MC-1的生物量的以700 nm下的吸光度表示(OD700),或者以干重表示(g/L)。 1.4 藻泥的采集和整理 当螺旋藻培养物光密度OD700达到1.2-1.5时,采用300目尼龙筛绢过滤采收,清水冲洗至少3遍去除无机盐成分。海水中试培养时,将采收藻泥铺开并切成40 mm×20 mm×3.0 mm大小的小片,晒干,密封保存。螺旋藻产业化生产中采用喷雾干燥。 1.5 重金属元素检测 总蛋白含量采用凯氏定氮法测定。叶绿素和胡萝卜素测定采用文献的方法进行。藻胆色素测定按照文献的方法进行。每个样品的测定重复3次。重金属元素分子采用等离子光谱法分析,由广州分析测试中心协助完成。镉的参照标准为食品中污染物限量中华人民共和国国家标准(GB/16740-1997),砷、铅、汞的参照标准为保