雨生红球藻室外大体积培养与虾青素积累初步研究.docVIP

雨生红球藻室外大体积培养与虾青素积累初步研究 雨生红球藻室外大体积培养与虾青素积累 初步研究 第45卷增刊 2006年5月 厦门大学(自然科学版) JournalofXiamenUniversity(NaturalScience) Vol,45Sup Mav2006 雨生红球藻室外大体积培养与虾青素积累初步研究 李晓梦,齐安翔,蔡明刚,庞卫文,张英,黄水英 (1.厦门大学海洋学系,2.厦门大学亚热带海洋研究所,福建厦门361005) 摘要:针对雨生红球藻(Haematococcuspluvialis)大体积室外培养开展实验,对不同品系藻株,不同营养方式,胁迫条件等对雨生红 球藻生长及虾青素积累的进行了初步研究.结果表明,HPM品系在室外培养过程中指数生长率为0.22,胁迫后虾青素产率为1.35 mvL,均优于其他两个品系.室外培养中加入醋酸钠的混合培养基可以缩短胁迫时间,并且其虾青素的积累量比光合自养培养下 提高了126.3%.盐胁迫比高光胁迫更能有效地积累虾青素,虾青素产率从0.76mg/L提高到了1.33mg/L. 关键词:雨生红球藻;虾青素;室外培养;胁迫条件;营养方式 中图分类号:Q178.53文献标识码:A文章编号:0438-0479(2006)S-0245-05 虾青素是一种近年来走人国际研发领域的类胡萝 卜素,广泛存在于自然界中,也是海洋动物体内主要的 类胡萝卜素之一.研究表明,虾青素具有清除氧自由基 的强大能力.其抗氧化性是类胡萝卜素的lO倍,维生 素E的550倍.被誉为超级抗氧化剂D.21.鉴于虾青 素卓越的生理功能,在国外已被应用于食品,医药等行 业及水产养殖业中J.据报道,雨生红球藻(Haemato— coccuspluvialis)在特定条件下可积累占干质量的1% 以上的虾青索.被看作是天然虾青索的浓缩品和最 好生物来源-4J.因此,利用雨生红球藻提取虾青索已 成近年来国际上虾青素研究的热点J. 目前,国外建立封闭式跑道池培养系统开展雨生 红球藻大规模室外培养;而国内仍处于实验室培养 阶段,且实验基本在培养箱内完成】.由此可见,我 国在雨生红球藻开发利用方面.与国际水平仍存在差 距,限制了利用雨生红球藻生产虾青素的大规模产业 化进程.另一方面,目前开发利用得较成熟的螺旋藻, 小球藻等已实现室外规模化生产.显然,开展雨生红球 藻室外大体积培养研究,是实现雨生红球藻的大规模 开发利用的必要条件.此外,尽管封闭培养条件下关于 不同营养,胁迫方式等对雨生红球藻的影响报道甚 众,但室外培养条件下,环境因子变化比较大.藻 液体积大,且较易沾污,该情况下的影响迄今仍鲜有报 道. 据此,本实验室在室外条件下,对雨生红球藻的品 系选择,营养方式,胁迫条件等方面开展大体积培养的 条件实验,考察上述不同条件下雨生红球藻的生长,虾 收入日期:2006-01-09 基金项目:厦门市科技项目(3052资助 作者简介:李晓梦(1986一),女,本科生. +通讯作者:mgcai@ 青素积累及其他相关指标的变化,为雨生红球藻的室 外规模化培养提供初步研究结果. 1材料和方法 1.1试验藻种 雨生红球藻原始藻种由中国科学院水生生物研究 所藻种库提供.HPH,HPM品系由福建师范大学生物 工程学院生物学系庄惠如老师提供. 1.2室外培养具体方法 (1)藻品系的筛选 采用BBM培养基,按照1:4的比例将HPH,HPM 和原始藻种分别扩养至1OL_四月初,在室外光强较 为合适处(2000—4000Ix)培养.每天定时记录光强, 温度和生长情况.指数生长期结束后搬至阳光直射处 进行胁迫(6000—40000lx).同时定时记录光强和温 度. (2)不同营养方式的比较 光合自养采用BBM培养基,混和营养培养方式 则以BBM培养基为基础,同时添加1LNaAc作为 碳源. (3)胁迫方式的比较 在第一阶段实验基础上,选取HPH,HPM和原始 藻种中较适合室外培养的品系.以BBM配方为培养 基,培养方式同前.共分为2组,其中l组在胁迫的同 时添加NaAc,将盐度调节到2%.另一组则采用高光 强胁迫,胁迫方式同前. 1.3相关生长指标测定方法 采用血球计数板进行细胞计数.实验结束后,取 50mL藻悬液,去上清液后干燥冷却至恒质量,计算单 位体积藻粉产率.相关方法参见张英等(2004).采 厦门人学(自然科学版)2006钲 用高效液相色谱(HPIC)法对样品虾青素进行分析测 定.色谱条件为:色谱柱为HypersilODS(5ism, 4.6mm×250mm,Germany)色谱柱;流动相为水,乙 腈和甲醇(75:25:10,byvo1.);流速为1.0mL/m