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鸡球虫疫苗研究进展 球虫病对畜牧业产生了严重的经济损失，世界每年损失5亿美元。虽然球虫病可以通过预防性使用广谱抗球虫药来控制, 但是由于球虫耐药性的不断出现, 使很多抗球虫药物使用年限不断缩短, 加上药物的研制费用很高, 以及人们对药物残留的日益关注, 迫切需要寻找新的防治球虫病方法, 这些新方法包括免疫学和遗传学的方法。对球虫病的控制, 应该从药物防治转变到接种疫苗上来。目前已经推向市场的球虫疫苗主要为强毒苗和弱毒苗。现对鸡球虫疫苗的研究情况作一综述。 1 保护小鼠的免疫组化 活疫苗的免疫原理是球虫在低水平感染时不会使小鸡发病, 但经过2~3次连续循环感染, 小鸡就会产生保护性免疫力。目前, 所有的商品化疫苗 (表1) 都是基于这个原则生产的。根据所选用球虫株的特点, 这些疫苗大体上可分为强毒球虫苗、弱毒球虫苗和耐离子载体类球虫活苗。 1.1 强毒苗 1.1.1 球虫覆盖鸡组 强毒球虫苗是直接从野外分离强毒株研制而成的。一般研制方法是先直接从自然发病的病鸡体内或粪便中采用饱和食盐水漂浮法收集球虫混合卵囊, 然后采用单卵囊分离法分离并增殖各种艾美耳球虫卵囊, 并按一定比例混合, 配以适当的稳定剂, 即组成强毒活苗。 1.1.2 接种疫苗的免疫效力 Edgar通过饮水或拌料给4~10日龄鸡接种含有8种鸡球虫的混合孢子化卵囊, 通过鸡体繁殖把子代卵囊播散到垫料上, 使鸡群通过反复感染不断增强免疫力。这种混合卵囊就是世界上首创的第一个球虫疫苗Coccivac, 该疫苗1952年由Porn和Mitchel动物保健公司推向市场。后来, 加拿大李容丰提出凝胶接种体系, 也就是在加拿大和美国广为使用的鸡球虫苗Immucox。目前, 在养禽业使用的这2种疫苗中, Coccivac D○R和Immucox C2○R含有8种艾美耳球虫, 而Coccivac B○R和Immucox C1○R这2种疫苗则含有4种艾美耳球虫。Mathis G F报道, 使用喷雾法对平养鸡接种Coccivac B○R强毒苗, 在21日龄时接种疫苗组的增重率和饲料转化率均低于给药组, 但28~42日龄时给药组增重率和饲料转化率低于接种疫苗组。Mathis G F和Lang M在另一个试验中, 对地面平养鸡接种Coccivac B○R强毒疫苗, 并与盐霉素和尼卡巴嗪作对比, 结果第5周龄时接种疫苗组与用药组的生产性能差异不显著, 但是到第6周龄时, 接种疫苗组生产性能显著高于给药组。Danforth H D等人报道, 在35日龄时, 接种Immucox○R强毒苗组体重明显低于用药组, 但到了56日龄时, 体重差异不显著。Guzmana V B等人应用ELISA法测定了强毒苗Coccivac○R和弱毒苗Livacox○R免疫4日龄试验鸡后血清中的特异性IgG水平, 结果在接种疫苗当天和接种疫苗后第21天, 接种疫苗组鸡的IgG阳性水平均高于对照组, 表明接种活球虫疫苗可以有效控制鸡球虫病的发生。黄兵等人测验Immucox球虫苗在中国后备蛋鸡的安全性和有效性时发现, 疫苗免疫的鸡未出现球虫病死亡, 且长势良好, 各项生产指标优于盐霉素、球净和球虫宁对照组。 1.1.3 球虫病的发生 强毒苗所含的是活球虫株, 因此, 在疫苗接种至产生坚强免疫力期间不得使用任何抗球虫药, 这个期间有可能发生球虫病;由于强毒苗是由各种球虫强毒株混合组成, 如应用不当, 会引起球虫病的爆发;强毒苗中所含的球虫卵囊在水中沉降较快, 易造成免疫不均匀, 必须寻找较好的悬浮剂搭配使用;接种强毒球虫苗, 可能将强毒球虫引入新鸡场, 建议在新的养鸡场中应该避免使用这种类型的疫苗。 1.2 虚弱的毒苗 1.2.1 保持免疫原性 弱毒活苗是由野外分离的强毒株进行致弱后的弱毒虫株研制而成的。这些致弱虫株致病力比亲本株大大降低, 但保持了良好的免疫原性, 既能产生足够的免疫力, 又不会对肠道造成严重的损伤。目前球虫强毒株的致弱方法主要有鸡胚传代、早熟选育、理化处理和细胞培养4种。 1.2.2 对paracoxr致弱虫苗和给予抗球虫药物的疗效 1992年, 英国豪顿研究所研制出了世界上第一种弱毒球虫疫苗Paracox。目前, 在国外使用较多的2种弱毒疫苗是Paracox○R(早熟株) 和 Livacox○R(早熟株和TA 株) 。Williams R B等人在接种Paracox○R致弱虫苗和给予抗球虫药物的疗效对比中, 发现用药组的饲料转化率明显低于接种疫苗组, 而且接种疫苗组的死亡率也低于给药组。Carlyle W W H等人在英国进行了最大规模的Paracox○R疫苗对鸡通过饮水进行免疫接种试验, 使用活的弱毒球虫疫苗Paracox○R(含有7种柔嫩艾美耳球虫株) 与穿梭用药 (先用常山酮然后用盐霉素或者先用尼卡巴