比对两台实时荧光定量PCR扩增仪对新型冠状病毒检测的结果分析.pdf

· 医学诊疗技术 · 比对两台实时荧光定量PCR扩增仪 对新型冠状病毒检测的结果分析 周颖祯 江苏省苏州市中西医结合医院检验科　江苏苏州　215101 摘　要：目的：对实验室内两台扩增仪进行仪器比对，以确保实验室两台扩增仪检测结果的质量。方法：在同样的环境条件下，使用相同 的检测方法、检测试剂以及检测人员，使用两台不同的扩增仪来检测同一样品，最后计算不同仪器的阳性靶基因CT值，通过数据分析判断实 验室内两台仪器是否符合要求。结果：两台扩增仪互相之间阳性靶基因CT值相对偏倚百分比小于ISO15189要求的7.5%。结论：两台核酸扩增 仪仪器准确可信，均可用于临床检测。 关键词：新型冠状病毒；仪器比对；实时荧光定量PCR仪 随着新型冠状病毒疫情的不断演变[1]，各地疾控部门为了防止 2　结果 疫情反弹，督促各医疗检测点增强检测质量的同时不断提高检测能 2.1计算公式及参考范围 力。因此本实验室在原有的一台实时荧光定量PCR扩增仪基础上，另 偏倚百分比公式=（实验仪器靶基因CT值-参比仪器靶基因CT 引进一台扩增仪。为了保证仪器稳定，结果可靠，再结合IOS15189 值）/参比仪器靶基因CT值*100% 《医学实验室质量和能力认可准则》的要求，需要对两台实时荧光定 参考范围：相对偏倚百分比7.5% 量PCR扩增仪就新型冠状病毒检测能力上做比对分析认证。 2.2数据比对及结果分析 1　材料和方法 记录周一至周五两台扩增仪对1-5号样本两个阳性靶基因和内标 1.1检测样本 的CT值，计算相对偏倚百分比值如下表1，可见所有比对试验偏倚百 湖南圣湘生物新型冠状病毒检测试剂盒中阳性对照通过稀释调 分比值均远小于7.5%，说明ABI QuantStudio5与ABI 7500在检测新 成的4种不同浓度的模拟阳性样本和一例刮取本实验室工作人员并已 型冠状病毒实验中具有可比性，均可用于临床试验。 经经过检测证实为阴性的咽拭子样本。（所有人源性样本用作科学实 3　讨论 验及论文研究已取得本人知情同意） 从2019年12月至今，全球因新型冠状病毒引发的肺炎疫情还在 1.2试剂与仪器 持续，其中实时荧光定量PCR检测技术是检验核酸RNA的特效方法之 湖南圣湘生物生产的2019新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测试 一 [2]。各检测机构也积极响应国家号召，努力提升核酸检测能力。每 剂盒（荧光PCR法），检测扩增试剂批号：2020160；稀释用阳性对照 当节后或某地出现本土病例反弹时，都会迎来一波检验高峰期，这时 试剂批号：2020160；仪器：扩增仪-ABI QuantStudio5（参比仪器）； 就要求各检测机构对实验室内多台扩增仪性能有一个较高的水准 [3]。 扩增仪-ABI 7500（实验仪器）； 我们将定期通过卫生部、省临检中心质控的ABI QuantStudio5 1.3方法 仪器作为参比仪器，将ABI 7500作为实验仪器，通过我们的仪器比对 在样本制备区生物安全柜中，设计将湖南圣湘生物提供的新型 实验验证了ABI 7500的性能良好，结果与ABI QuantStudio5相符合， 冠状病毒检测试剂盒中的阳性对照（