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- 2023-09-13 发布于湖北
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实验一 细胞膜的渗透性
一、实验目的
了解细胞膜对物质渗透的一般规律。
了解溶血现象及其发生机制。
二、实验原理
细胞膜为一种半透膜,对物质的通透具有选择性。当红细胞放入低渗溶液时,细胞吸水膨胀而发生溶血。当红细胞放入含有不同溶质的等渗溶液中时,由于细胞膜对不同溶质的透性不同,细胞发生溶血的时间也会不同,故发生溶血现象时间长短可作为测量物质进入红细胞速度的一种指标。
三、实验操作
从集市买适量活鸡血,取5ml(防止污染),放入盛有20ml Alsever’s液瓶中,混匀后置冰箱保存备用(2周内使用)。
使用前取用Alsever’s液保存的新鲜鸡血5ml,加入8ml的0.128mol/L NaCl溶液,小心混匀,1000r/min 离心5min,如此3次洗涤,最后配成30%的鸡红细胞(CRBC)悬液。
取11支试管,按附表中所示测试溶液,分别取样各3ml,作出标记后,各管均加入红细胞悬液2滴,混匀后静置于室温中,观察各支试管中发生溶血的时间及变化。
四、观察结果
试管内液体分两层:上层浅黄色,下层红色不透明为不溶血(―),镜检红细胞完好呈双凹盘状。
如果试管内液体浑浊,上层带红色者,称不完全溶血(+或++),镜检部分红细胞呈碎片。
如果试管内液体变红色而透明者,称完全溶血(+++),镜检发现细胞全部呈碎片。
五、实验建议
鸡血在离心时,试管均需在扭力天平上平衡。
目测红细胞体积或置于带刻度的离心管中,加入生理盐水配成30%的红细胞悬液。、
试管中有红细胞和测试溶液时,不应强力摇晃,以免造成人为的红细胞破裂。
实验报告及作业
表1 各种溶液的溶血现象观察结果
编号 测试溶液 是否溶血 时间 分析原因
0.128mol/L NaCl
0.05 mol/L NaCl
0.4 mol/L NaCl
0.128 mol/L NaNO3
0.128 mol/L NH4Cl
0.128 mol/L NH4AC
0.32 mol/L NaCl甘油
0.32 mol/L NaCl乙醇
0.32 mol/L NaCl丙酮
0.32 mol/L NaCl葡萄糖
H2O
※书写实验报告,并就细胞膜对不同物质的渗透性不同,对实验结果进行分析见表1。
※目测判断标准:快速溶血:+++;慢速溶血:++或+;不溶血:―
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