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陈华毅;一、课题目标 ;基础知识 ;2.固定化酶的反应柱示意图;3.固定化酶在生产实践中的优点;(二)固定化细胞技术;2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别;3.固定化酶和固定化细胞常用的载体材料 ;(一)制备固定化酵母细胞;(二)用固定化酵母细胞发酵; 在缺水的状态下,微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需要的活化时间较短,一般需要0.5~1 h,教师需要提前做好准备。此外,酵母细胞活化时体积会变大,因此活化前应该选择体积足够大的容器,以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。 ; (二)加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环,涉及到实验的成败,如果海藻酸钠浓度过高,将很难形成凝胶珠;如果浓度过低,形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少,影响实验效果。; (三)刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间,以便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格,可以使用下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压,如果凝胶珠不容易破裂,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作成功。二是在实验桌上用力摔打凝胶珠,如果凝胶珠很容易弹起,也能表明制备的凝胶珠是成功的。;
下面是利用固定化酵母细胞发酵生产啤酒的实验过程:
步骤1:酵母细胞的活化。称取lg干酵母置于50mL烧杯中,加l0mL蒸馏水,搅拌,静置1h。
步骤2:配制物质的量浓度为0.05mol/L的氯化钙(CaCl2)溶液。; 步骤3:配制海藻酸钠溶液。称取0.7g海藻酸钠置于50mI.烧杯中,加l0mL蒸馏水,由于海藻酸钠在水中溶解速度很慢,所以50mL的烧杯要放在酒精灯上用旺火持续加热,并用玻璃棒搅拌。
步骤4:?
步骤5:固定化酵母细胞。以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的氯化钙(CaCl2)溶液中形成凝胶珠,让凝胶珠在氯化钙(CaCl2)溶液中浸泡30分钟。
;步骤6:固定化酵母细胞(凝胶珠)用蒸馏水冲洗2~3次。
步骤7:将适量的凝胶珠放人500mL锥形瓶中,加300mL已消毒的麦芽汁,封口于25℃下发酵。
(1)步骤4的正确操是: 。
(2)找出上述步骤中的一处错误并改正
(3)步骤6用蒸馏水冲洗2~3???的目的是 ;酵母细胞的活化
配制CaCl2溶液
配制海藻酸钠溶液
海藻酸钠溶液与酵母细胞混合
固定化酵母细胞; 思考:
1.影响实验成败的关键步骤是
2.如果海藻酸钠浓度过低,形成的凝胶珠所包
的酵母细胞数目
3.如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,说明
4.固定化细胞技术一般采用包埋法固定化,原因是 ;当堂训练;欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验
该实验小组用如图所示的装置来进
行葡萄糖发酵。 a 是 b 是
① 从上端漏斗中加入反应液
的浓度不能过高的原因是
② 要想得到较多的酒精,
加入反应液后的操作是
关闭 活塞 1
和 关闭 活塞 2。 ;③ 为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可以反复利用,实验过程一定要在 无菌 条件下进行。
④ 装置中的长导管起的作用是
利用固定化酵母细胞进行酒精发酵,与直接接种酵母菌相比较有哪些优点?(说出两点) 。 ;固定化细胞技术与固定化酶技术相比,所具备的特点是D
成本更低、操作更容易、不能连续性生产
成本更高、操作更难、不能连续生产
成本更低、操作更容易、能连续生产
成本更低、操作更难、能连续生产;用固定化酵母细胞发酵葡萄糖溶液时,为了能产生酒精,下列措施错误的是A
A向瓶内泵入氧气
B应将装置放于适宜的条件下进行
C瓶内应富含葡萄糖等底物
D应将瓶口密封,效果更好;研究认为,用固定化酶技术处理污染物是很有前途的,如将大肠杆菌得到的三酯磷酸酶固定到尼龙膜上制成制剂,可用于降解残留在土壤中的有机磷农药,与微生物降解相比,其作用不需要适宜的( D )
A.温度 B.酸碱度
C.水分 D.营养;下列固定化酵母细胞的制备步骤中不恰当的是C
A.应使干酵母与水混合并搅拌,以利于酵母菌活化
B
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