高中生物学竞赛辅导课件08微生物在药学中的应用.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 霉菌和酵母菌总数的测定 阴性平板不长菌 25－28℃培养72 h 取菌落数在5~50以内的稀释度计算 * * 控制菌（质控菌）的检查 口服药—不能检出大肠杆菌 脏器来源口服制剂—不能检出沙门氏菌、大肠杆菌菌。 外用药、眼科制剂—不能检出金葡菌、绿脓杆菌。 *举 例－大肠杆菌的检查 * *  E.coli 增菌液—胆盐乳糖培养基 EMB（伊红美兰培养基）：分解乳糖，紫黑色金属光泽菌落 形态结构— G- ，短杆菌 菌落特征 IMVIC：++－－ * * 活螨的检验 直检法 飘浮法 分离法 * * 酶抑制剂(enzyme inhibitor)主要是微生物产生的一类小分子生理活性物质，它们能够特异性抑制某些酶的活性而被筛选出来。来源于微生物的酶抑制剂，具有低毒性、小分子量、结构新颖以及结构的多种多样性等特点。是研究生物功能和疾病过程有用的工具。在医药方面，酶抑制剂已被用于增强免疫、生理功能调节、疾病治疗、治疗抗药菌感染等多个方面。 * * MIC的测定 MBC的测定 杀菌曲线 * * 试管连续稀释法 适用于试验菌数量较少的场合，试验工作量大 平板倍比稀释法 目前抗生素的临床前研究一般采用平板倍比稀释法。平板倍比稀释法是根据药物在琼脂培养基中扩散的原理，将细菌接种在含有不同浓度抗生素的平板上恒温培养16~18小时，可抑制细菌生长的最低药物浓度为最低抑菌浓度（MIC），可杀灭细菌的最低药物浓度为最低杀菌浓度（MBC）。MIC或MBC值愈小，则药物的抑菌或杀菌作用愈强。 * * * * 采用4倍于MIC的药物浓度，将一定浓度的菌悬液与药物混合，使其浓度为105 CFU/ml左右，于37℃恒温培养，定时取样进行平板活菌计数，肺炎链球菌采用血平板活菌计数。以细菌浓度对数为纵坐标，培养时间为横坐标，绘制杀菌曲线。实验应包括空白对照和阳性对照。药物的杀菌效果越好，细菌浓度随培养时间下降的越快，药效越好。 * * 以放线菌为例： ??? 从土壤中分离放线菌（初筛）→斜面 → 摇瓶 → 滤纸片抗菌试验（G-，G+）。 抗生素产生菌的筛选 * * 菌种 → 孢子制备 → 种子制备 → 发酵 → 发酵液预处理 → 提取及精制→ 成品检验 → 成品包装 抗生素的制备 * * 需氧发酵 深层发酵 纯种发酵 * * 抗生素是次级代谢的产物 对微生物自身的生长、繁殖无显著功能 与初级代谢紧密相连 在一定条件下能大量合成 * * 抗生素生物合成的主要代谢途径 抗生素合成的基本过程 抗生素合成有关的主要代谢途径 抗生素生物合成的调节与控制 * * 营养物摄入细胞→形成初级代谢中间产物（或初级代谢产物）→合成抗生素前体→抗生素前体经修饰、重排等→进入各抗生素所特有的合成途径→聚合或装配，合成抗生素。 * * 受产生菌生长速率的调节 受分解代谢物调节 需要合适的初级代谢基础 * * 本讲结束，请及时复习！ * * * * * * * * * * * * * * * * * 2020高中生物学奥林匹克竞赛 * 第八讲 微生物在药学中的应用 * 2 微生物制药 药物制剂的微生物检查 * * 抗生素 氨基酸 维生素 甾体化合物 酶与酶抑制剂 菌体制剂与活菌制剂 其他产物 * * 抗生素是生物在其生命活动过程中产生的（以及用化学、生物、生物化学方法衍生的），能在低微浓度下有选择性抑制或影响它种生物功能的有机化合物。 * * 抗生素的分类 抗生素的体外与体内药效 抗生素的单位及效价测定 抗药性 * * 连续稀释法（液体培养基、固体培养基） 琼脂扩散法（滤纸片法、打孔法、挖沟法） 活菌记数法 石炭酸系数测定法 * * 重量单位?? 以抗生素活性部分的重量为单位，1mg=1000 U 类似重量单位 以抗生素盐类重量，1mg=1000 U 重量折算单位??? 青霉G钠盐：1mg=1667u（以50ml肉汤中抑制金葡菌生长的最小青霉素量为1 U） 特定单位 标准品—中国药品生物制品检定所分发 标示量 抗生素制剂标签上的标量（单位或重量） 效价＝样品的抗菌活性/标准品的抗菌活性 * * 物理方法 化学方法 微生物学方法 稀释法 比浊法 琼脂扩散法 ☆管碟法——二剂量法（常用） * * SH SL UH UL θ=D · antilog（IV/W) W=(SH+UH)-(SL+UL