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随机siRNA文库的构建及NSCLC MDR相关标志物的筛选的中期报告 本研究旨在构建一个大规模的随机siRNA文库用于筛选NSCLC (非小细胞肺癌) MDR (多药耐药) 相关标志物。中期报告如下： 1. 文库构建 我们通过化学合成、PCR 扩增以及连接等技术，成功构建了一个包含30万个具有随机引物的 siRNA 序列文库。对该文库进行酶切和测序验证，确保了每个序列的唯一性和随机性。 2. 细胞株筛选 为了寻找具有 MDR 特征的 NSCLC 细胞株，我们用常规药物敏感性检测法筛选了五种 NSCLC 细胞株，并以表达 P-gp (多药耐药蛋白) 的 A549/Taxol 细胞株为阳性对照。结果表明，H460 和 A549 细胞株对化疗药物的抵抗性程度较高，且在 P-gp 的表达上也有显著差异。 3. siRNA筛选 我们随机挑选了20个 siRNA 序列用于 H460 细胞株的筛选，并采用 MTT 法进行细胞毒性和化疗敏感性检测。初步筛选结果表明，其中三个 siRNA 片段能够显著抑制细胞增殖，同时也明显增强细胞对化疗药物的敏感性。这些 siRNA 片段将进一步进行测序和信息学分析，以确定其靶向的基因或信号通路。 综上，我们已经初步建立了一个具有丰富的 siRNA 序列的文库，并发现了一些潜在的 MDR 相关标志物。接下来，我们将继续优化筛选流程，以期获得更多有价值的结果。