表面等离子体共振技术在微量生物和化学活性物质测定中的应用.docxVIP

表面等离子体共振技术在微量生物和化学活性物质测定中的应用 传感器是将生物或化学等物理变量转换为实用、存储和处理的物理电源的变换装置，在长寿、化学、环境科学等领域发挥着非常重要的作用。目前应用较为广泛的为光学和电学传感器。光化学传感器中的光纤传感器与电学传感器相比,具有信号不受电磁干扰、不需参比传感器、可以加工成各种尺寸、易于实现远距离遥测等优点,日益受到相关领域尤其是生物医学学科的科技工作者的青睐。 光纤表面等离子体传感器是将高灵敏度的表面等离子体传感技术与低能量消耗的光纤传输技术有机结合的产物。它能够对传感器表面待测介质组成的微小变化作出灵敏的响应,适用于研究传感器表面敏感层中物质与介质溶液的生物及化学反应,进而定量测定介质溶液中的微量生物和化学活性物质。1993年Jorgenson等人提出了两种基于光纤的表面等离子体(SPR)传感装置,使得光纤表面等离子体传感技术得以实际应用。目前该技术在化学、生物、环境及医药等领域已展现出了广阔的应用前景。 1 金属薄膜镀后金属膜表面等离子体共振的测量 存在于金属或半导体表面的自由电子的行为类似于自由电子气,当这些表面自由电子与特定的电磁波相互作用时,将吸收电磁波的能量,从而产生表面等离子体共振。 光线从光密介质向光疏介质传播时,若入射角大于临界角,则在两种介质的界面处将发生全内反射。但是,光波的电磁场强度在界面处并不立即减小为零,而是部分地进入到光疏介质中,随入射深度以指数形式衰减,形成所谓的消逝波,消逝波的有效深度一般为100～200 nm。因消逝波的存在,光线在界面处的全内反射将产生一个位移。若光疏介质很纯净,在没有吸收和其它消耗的情况下,则消逝波沿光疏介质表面传播约半个波长,再返回光密介质,全内反射强度并不会被衰减。 将一层高反射的金属薄膜镀在玻璃或石英支持体上,当光以一定的入射角透过支持体照射到金属薄膜的表面并发生全反射时,由于金属膜的厚度(约50 nm)小于消逝波的深度,在金属与溶液或空气的界面处,消逝波仍起作用,其在X轴方向的分量(见图1)为: Kev=ωcε0??√sinθ(1)Κev=ωcε0sinθ(1) 式中:ω是入射光的角频率;ε0是支持体的介电常数;θ是入射光的入射角;c是光速。 同时,在金属和溶液或空气的界面处,金属表面的自由电子气将被激发,产生振荡电荷,从而形成表面等离子体激元: Ksp≈ωcε1ε2ε1+ε2????√(2)Κsp≈ωcε1ε2ε1+ε2(2) 式中:ε1是金属膜的介电常数;ε2是金属膜表面样品的介电常数;其它项同式(1)。 当Ksp和Kev相等时,金属表面的等离子体激元将与消逝波发生耦合,产生表面等离子体共振吸收,反射光强度急剧下降,达最小。此时的入射角θsp称共振角。入射光中,只有p偏振光能激发表面等离子体共振。 Ksp=Kev(3)Κsp=Κev(3) 此时: sinθsp=f(ω,ε0,ε1,ε2)(4)sinθsp=f(ω,ε0,ε1,ε2)(4) 在实际测量时,往往利用金属膜表面的样品的折射率来替代其介电常数,以入射光的波长λ替代角频率ω,且ε0和ε1为常量,故式(4)可用下式描述。 sinθsp=f(λ,n)(5)sinθsp=f(λ,n)(5) 式中:λ为入射光波长;n为金属膜表面样品的折射率。而样品的折射率又与样品中待测化学或生物量(m)的大小有关,故有: sinθsp=f(λ,m)(6)sinθsp=f(λ,m)(6) 由于消逝波的有效深度仅100～200 nm,表面等离子体共振所测得的化学或生物量m仅是金属表面很短距离内的值,而非其本体值,因此SPR是研究表面作用的一种很有效的手段。 SPR测量所用的支持体通常是棱镜,测量装置见图2。金属薄膜材料通常是金或银,金属薄膜表面的敏感层是一种能与待测物相互作用的化学或生物敏感膜,以将化学或生物量转化为可用SPR技术测量的折光率变化量,实现对化学及生物量的测定。 2 光纤表面等离子体传感装置的发展 随着光纤制作和传输技术特别是光纤传感技术及光纤器件的发展,光纤在化学及生物医学传感领域得到了广泛应用。光纤作为光通信的远距离光传输介质,传输过程中,耦合进入的光在纤芯和包层界面发生全内反射,因此在长距离传输过程中,光损耗较小。全内反射传输光的纤芯,正好可以作为SPR测量的金属薄膜支持体,在纤芯的表面镀上一层金属膜,光纤就可以作为SPR测量的敏感器件。自Jorgenson等人提出了基于光纤的SPR传感装置之后,光纤表面等离子体传感器在化学、生物学、环境科学以及医学领域的文献报道逐年增多。 有两种形式的光纤表面等离子体传感装置。一种是终端反射式,另一种是在线传输式。其结构见图3。 在线传输式光纤SPR传感装置是将光纤中间一段的外层剥去,在纤芯上沉积一层高反射率的金属膜。在纤芯内进行全反