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⽣物技术总复习资料 ⼀、发酵⼯程 1、发酵：利⽤微⽣物在有氧或⽆氧条件下的⽣命活动来制备微⽣物菌体或其代谢产物的过程统称为发酵。 2、发酵类型： 敞⼝发酵、密闭发酵、浅盘发酵、深层发酵 分批发酵、连续发酵、补料分批发酵 好氧性发酵、厌氧性发酵 固体发酵、液体发酵 1）微⽣物菌体发酵：以获得具有某种⽤途的菌体为⽬ 的的发酵。 2）微⽣物酶发酵：以获得微⽣物酶为⽬的的发酵。 3）微⽣物代谢产物发酵：以获得微⽣物初级、次级代谢产物为⽬的的发酵。 4）微⽣物的转化发酵：是利⽤微⽣物细胞的⼀种或多种酶，把⼀种化合物转变成结构相关的更有经济价值的产物。 5）⽣物⼯程细胞的发酵：是利⽤⽣物⼯程技术所获得的细胞，如DNA 重组的“⼯程菌”以及细胞融合所得的“杂交”细胞等进⾏ 培养的新型发酵。 3、发酵技术的特点: ①发酵过程以⽣命体的⾃动调节⽅式进⾏，数⼗个反应过程能够在发酵设备中⼀次完成； ②反应通常在常温常压下进⾏，条件温和，能耗少，设备较简单； ③原料通常以糖蜜、淀粉等碳⽔化合物为主，可以是农副产品、⼯业废⽔或可再⽣资源（如植物秸秆、⽊屑等），微⽣物本⾝ 能有选择地摄取所需物质； ④容易⽣产复杂的⾼分⼦化合物，能⾼度选择性地在复杂化合物的特定部位进⾏氧化、还原、官能团引⼊或去除等反应； ⑤发酵过程中需要防⽌杂菌污染，⼤多情况下设备需要进⾏严格的冲洗和灭菌，空⽓需要过滤等。 菌种 （上游技术） 4、发酵⼯程典型⼯艺流程：发酵 （中游技术） 提炼（下游技术） 上游技术： 1）发酵⼯业中常⽤微⽣物： 原则：易培养、⽣长快、发酵周期短、经济、抗性强、容易控制 其⽣长、安全⽆害 细菌：枯草芽孢杆菌、软酸杆菌、醋酸杆菌、棒状杆菌、短杆菌， 主要⽤于⽣产淀粉酶、乳酸、醋酸、氨基酸和肌苷酸； 放线菌：链霉菌属、⼩单孢菌属、诺卡⽒菌属，主要⽤于⽣产多 种抗⽣素； 酵母菌：酿酒酵母、假丝酵母、类酵母，主要⽤于酿酒、制造⾯ 包、制造低凝固点⽯油和⽣产脂肪酶以及⽣产可⾷⽤、药⽤和饲料⽤的酵母菌体蛋⽩； 霉菌：藻状菌纲的根霉、⽑霉、犁头霉、⼦囊菌纲的红曲霉、半 知菌纲的曲霉、青霉，主要⽤于⽣产多种酶制剂、抗⽣素、有机酸及甾体激素； 担⼦菌 藻类 2）优良菌种选育： ⾃然选育： 诱变育种： 杂交育种： 代谢控制育种： 分⼦育种： 3）培养基的制备： 培养基的类型： 合成培养基 ①按纯度分： 天然培养基（复合培养基） 液体培养基（最常⽤） ②按状态分：固体培养基（琼脂15%-20%） 半固体培养基（琼脂0.5%-0.8%） 孢⼦培养基 ③按⽤途分：种⼦培养基 发酵培养基 培养基的组成： ①碳源：构成菌体和产物的碳架及能量来源。常⽤的碳源有：单糖（葡萄糖、果糖）、双糖（蔗糖、麦芽糖)、油脂（补充碳 源和消沫）、糖蜜、乳糖、有机酸、醇、碳氢化合物、⽯油产品、糊精 ②氮源：构成菌体的细胞成分和产物的前体。常⽤的氮源有：有机氮源（尿素、黄⾖饼粉、花⽣饼粉、棉籽饼粉、⽟⽶浆、蛋 ⽩胨、酵母粉、鱼粉）、⽆机氮源（氨⽔、硫酸铵、氯化铵、硝酸盐） ③⽆机盐和微量元素：构成菌体原⽣质的成分、作为酶的组成成分或维持酶的活性、参与产物的⽣物合成、调节细胞的渗透压 和影响细胞膜的通透性。常见的有：主要元素（P、S、Mg、K、Ca）、微量元素（Fe、Cu、Mn、Zn） ④⽣长因⼦ ⑤⽔ ⑥产物形成的诱导物、前体、促进剂和抑制剂 ⑦消沫剂:植物油、动物油、化学合成的⾼分⼦化合物（聚氧丙烯⽢油、硝消化剂） 中游技术： 1)⼯业发酵灭菌： 灭菌的⽅法： ①热灭菌： ⼲热灭菌：⽕焰灭菌法、⼲热空⽓灭菌法（160 ℃—170 ℃，1—2h） 湿热灭菌：煮沸灭菌法（100℃，15—20min）、巴⽒消毒法（60—62℃，30min或70℃，15min，低温维持 法，72℃，15s，⾼温瞬时法）、间歇灭菌法、⾼压蒸汽灭菌法 （湿热灭菌优点：⽐⼲热灭菌效⼒⼤，因为蛋⽩质易凝固，湿热蒸汽的穿透⼒⼤，湿热蒸汽的潜能迅速提⾼） ②射线灭菌：紫外线 ③化学药品灭菌：甲醛、苯酚、⾼锰酸钾、氯化汞 ④空⽓灭菌： 加热灭菌：将空⽓加热⾄⼀定温度，并维持⼀段时间，杀死空⽓中的微⽣物（空⽓压缩，200℃以上） 静电除菌：利⽤静电引⼒来吸附带电粒⼦在电极上，⽽达到除尘灭菌的⽬的。常除去空⽓中的⽔雾、油雾、尘埃以及空⽓中的 微⽣物。 介质过滤除菌：（发酵⼯业上最多采⽤来制备⼤量⽆菌空⽓）使空⽓通过⾼温灭菌的介质过滤层，将空⽓中的微⽣物等颗粒阻 截⽽获得⽆菌空⽓的⽅法。⼜分为： 绝对介质过滤除菌：介质之间的空隙⼩于被 滤除的