药物靶标发现与筛选详解演示文稿.pptVIP

Inhibition of capillary tube formation in vitro J Biol Chem. 2003;278(48):47812-47819 本文档共106页；当前第62页；编辑于星期三\16点46分 三、蛋白质靶标 2、生色团辅助激光灭活(chromophore-assisted laser inactivation ,CALI) 本文档共106页；当前第63页；编辑于星期三\16点46分 CALl能够直接对蛋白质进行操作，而不是通过对蛋白质量的变化进行检测。将标记有孔雀绿染料的非功能灭活抗体与特异性蛋白质结合，然后对蛋白质复合物进行激光照射。染料受激光激发短暂的产生活性分子，对结合的蛋白质造成破坏而起到灭活作用，但不影响其他蛋白质组分。 本文档共106页；当前第64页；编辑于星期三\16点46分 A lentiviral system for simultaneous knockdown and rescue with a functional EGFP-fusion complement. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104(16):6702-6707 本文档共106页；当前第65页；编辑于星期三\16点46分 CALI of EGFP-CP induces the formation of dorsal ruffles and filopodia only in the knockdown/rescue background. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104(16):6702-6707 本文档共106页；当前第66页；编辑于星期三\16点46分 CALI of EGFP-CP in KDR cells generates a local increase in barbed ends of actin filaments and dorsal F-actin. Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104(16):6702-6707 本文档共106页；当前第67页；编辑于星期三\16点46分 CALI of EGFP-Mena in Mena/VASP-deficient cells induces more stable lamellipodial protrusions Proc Natl Acad Sci U S A. 2007;104(16):6702-6707 本文档共106页；当前第68页；编辑于星期三\16点46分 三、蛋白质靶标 3、蛋白质组技术 本文档共106页；当前第69页；编辑于星期三\16点46分 基 因 基因是一段DNA（脱氧核糖核酸分子）双链。 － 碱基成对出现: ATCGGCC TAGCCGG 本文档共106页；当前第70页；编辑于星期三\16点46分 基因表达中的信息流 中心法则（The Central Dogma） 本文档共106页；当前第71页；编辑于星期三\16点46分 蛋白质翻译 本文档共106页；当前第72页；编辑于星期三\16点46分 蛋白质结构的层次 一级结构 - 氨基酸序列 二级结构 - 主要由氢键稳固的局部构象， 如?-helix, ?-sheet等 三级结构 - 三维构象 四级结构 - 多个多肽链的组合 本文档共106页；当前第73页；编辑于星期三\16点46分 蛋白质结构的图形描述 分子表面 - 分子可视化 - 分子对接 - 基于结构的药物设计 - … 本文档共106页；当前第74页；编辑于星期三\16点46分 蛋白质组分析的首要要求 将来自于全细胞、组织或生物体中所包含的多达几千种混合蛋白质进行分离、检测和分析 。 2-DE技术依然是大多数蛋白质组研究中分离复杂蛋白质混合物的首选技术 。 本文档共106页；当前第75页；编辑于星期三\16点46分 生物学问题的提出 实验模型的设计 实验组和对照组样品的制备 蛋白样品的IEF和PAGE电泳分离 图像扫描和初步分析 感兴趣蛋白点的切取 胰酶对脱色后蛋白质的消化 质谱的多肽指纹图、微测序分析 质谱结果的生物信息学分析和比对 新蛋白质的发现 其它实验的进一步验证 蛋白信息的初步获得 本文档共106页；当前第76页；编辑于星期三\16点46分 蛋白质组研究的基本技术路线 蛋白质样品的制备 双向电泳 图像分析 转印至膜上的蛋白 凝胶中的蛋白 溶液中