无菌方法试验（直接接种法）.docxVIP

日期: 日期: 日期: 日期: XXX有限公司 XXX无菌方法验证方案 编制: 审核: 批准: 1、验证目的 确认样品的XX样品的抑菌活性， 验证依据 《中国药典》XX版四部 3、试验所采用的试剂设备 3. 1培养基 0. 9%氯化钠溶液 批号 胰酪大豆陈液体培养基批号 硫乙醇酸盐流体培养基批号 3. 2菌种 金黄色葡萄球菌［cmcc (B) 26003］ 大肠埃希菌［cmcc (B) 44102］ 生抱梭菌［cmcc (B) 64941］ 枯草芽袍杆菌［cmcc (B) 63501］ 白色念珠菌［cmcc (F) 98001］ 黑曲霉［cmcc (F) 98003］批号： 3.2设备 生物安全柜 编号： 生化培养箱 编号： 霉菌培养箱 编号： 证明所采用的的方法适用于其无菌检查。2、 ： 生产厂家： ： 生产厂家： ： 生产厂家： 批号： 生产厂家： 批号： 生产厂家： 批号： 生产厂家： 批号： 生产厂家： 批号： 生产厂家： 生产厂家： 型号： 型号： 型号： 4、实验方法 1采用直接接种法进行无菌检查方法验证。 2试验组 取x件包装样品以无菌操作方式打开，将样品分别投入能完全浸没样品的硫乙醇 酸盐流体培养基3管和胰酪大豆月东液体培养基3管，其中硫乙醇酸盐流体培养 基分别接入不大于lOOcfu的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和生抱梭菌，胰酪大 豆豚液体培养基分别接入不大于lOOcfu的枯草芽抱杆菌、白色念珠菌和黑曲霉。 其中硫乙醇酸盐流体培养基30-35七培养箱培养，胰酪大豆豚液体培养基置20-25寸 培养箱培养，培养时间不得超过5天，逐日观察，结果见表一。 阳性对照组 取硫乙醇酸盐流体培养基分别接入不大于lOOcfu的金黄色葡萄球菌、大肠 埃希菌和生抱梭菌，胰酪大豆脓液体培养基分别接入不大于lOOcfu的枯草芽抱 杆菌、白色念珠菌和黑曲霉。其中接种枯草芽抱杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃 希菌和生抱梭菌置30-35C培养箱培养，枯草芽抱杆菌、白色念珠菌和黑曲霉置 20-25C培养箱培养，培养时间不得超过5天，逐日观察，结果见表一。 阴性对照组 不采集样品，不加菌，同试验组方法，即空白硫乙醇酸盐流体培养基和胰 酪大豆豚液体培养基。培养14天，逐日观察，结果见表二。 样品组 取样品，同试验组操作，分别加硫乙醇酸盐流体培养基管和胰酪大豆陈液 体培养基管中，其中硫乙醇酸盐流体培养基30-35C培养箱培养，胰酪大豆陈液 体培养基置20-25C培养箱培养，培养14天，逐日观察，结果见表二。 5、结果 表一试验组和阳性对照组培养结果 组别 试验菌 培养时间（天） 1 2 3 4 5 试验组 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 生抱梭菌 枯草芽泡杆菌 白色念珠菌 黑曲霉 阳性对照组 金黄色葡萄球菌 大肠埃希菌 生袍梭菌 枯草芽抱杆菌 白色念珠菌 黑曲霉 表二 样品组和阴性对照组培养结果 组别 培养基 培养结果（天） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 阴性对照组 硫乙醇酸盐流体培养基 胰酪大豆陈液体培养基 样品组 硫乙醇酸盐流体培养基 胰酪大豆豚液体培养基 注：表中“+”表示有菌生长，表中“-表示无菌生长” 6、结论 通过表一和表二可以看出，采用直接接种法，与阳性菌相比，加入的6种 菌均可以正常生长，因此可以使用此方法作为xx的无菌检查方法，其中，阳性 对照菌为金黄色葡萄球菌。 注：如抑制某种菌，则按照药典选择相应的相应的对照菌种。