1.2.2 微生物的选择培养和计数(2课时).pptxVIP

1.2.2 微生物的选择培养和计数本节聚焦怎样运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养的原理？如何通过调整培养基的配方来有目的地培养某种微生物？ 测定微生物数量的常用方法有哪些？ 情境：某研究小组想在土壤样品中分离得到能分解尿素的细菌，但是土壤中还有许多其他微生物,而且在取的土壤中尿素分解菌的数量可能很少的情况下，仅通过一般的平板划线法或稀释涂布平板法很难实现，该怎么办呢？ 导入聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。讨论：1.筛选水生栖热菌的思路是什么样的？美国黄石公园耐高温的酶耐高温生物体高温环境（热泉、火山口）寻找寻找来自大自然的启示：寻找耐高温的DNA聚合酶 导入聚合酶链式反应（PCR）是一种在体外扩增DNA片段的技术，此项技术要求使用耐高温的DNA聚合酶。1973年，布鲁克在美国黄石国家公园的一个热泉中发现了耐热的水生栖热菌，并从这种菌种提取出耐高温的DNA聚合酶。讨论：2.为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢？ 这是因为水生栖热菌能在70-80℃的高温条件下生存，而绝大多数微生物在此条件下不能生存。美国黄石公园 耐寒微生物石油分解菌被石油污染的土壤冰川冻土层选择培养基实验室中如何从众多的微生物中筛选出单一菌种？ 任务一：选择培养基1.概念：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，叫做选择培养基。2.选择培养基筛选的原理： 人为提供有利于目的菌生长，同时抑制或阻止其他微生物生长的条件（包括营养、温度、pH等），进行实验室微生物的筛选。 3.类型条件分离得到的菌种（1）改变培养条件（2）添加某种化学物质（3）营养缺陷70～80℃的高温水生栖热菌加入青霉素酵母菌、霉菌等真菌高浓度食盐金黄色葡萄球菌不加含碳有机物不加氮源自养型微生物固氮菌举例： 任务二：选择培养基配方的设计尿素的立体结构 资料：尿素［CO(NH2)2］含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。尿素被土壤中某些细菌分解成NH3,再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收。1：你如何设计培养基配方，将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来？2：该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？培养基添加尿素作唯一氮源，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。缺乏脲酶的微生物由于缺乏氮源而不能生长发育繁殖，所以用此培养基就能够选择出分解尿素的微生物。细菌利用尿素的原因他们能合成脲酶。CO(NH2)2 + H2O 2NH3 + CO2 脲酶这种培养基与普通培养基相比，只是用尿素作为唯一氮源，培养基的其他营养成分基本相同。 牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂20.0g蒸馏水定容到1000ml培养基一KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml培养基二2.从用途上来讲，培养基二属于 培养基，目的是为了获得 。3.两种培养基共有的培养基成分有： 。培养基一的碳源为 ，氮源为 ；培养基二的碳源为 ，氮源为 。1.从物理性质来讲，两者属于_____ 培养基，判断依据是______________________。固体添加了凝固剂琼脂选择能分解尿素的微生物碳源、氮源、无机盐、水牛肉膏蛋白胨葡萄糖尿素 牛肉膏5.0g蛋白胨10.0gNaCl5.0g琼脂20.0g蒸馏水定容到1000ml培养基一KH2PO41.4gNaH2PO42.1gMgSO4·7H2O0.2g葡萄糖10.0g尿素CO(NH2)21.0g琼脂15.0g蒸馏水定容到1000ml培养基二4.是否能根据选择培养基和完全培养基上的菌落数目来证明选择培养基具有筛选作用？完全培养基的菌落数明显多于选择培养基上的菌落数 同理：将土壤稀释液中能分解纤维素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？设计一种选择培养基,用纤维素作为唯一碳源,可以将分解纤维素的细菌分离出来设计一种选择培养基,用石油作为唯一碳源,可以将分解石油的细菌分离出来思考：将土壤中能分解石油的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计？ 情境：如果你想知道1g土壤样品中有多少能分解尿素的细菌，平板划线法能否达到对细菌进行计数的目的？为什么？任务三：微