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第2章 细胞工程兰花繁殖除了分株还有其他更好的方法吗?国画作品 —兰 如果靠自然繁殖,兰花的价格可想而知了,如何能让名贵的兰花大量、快速地繁殖,从而走入寻常百姓家呢?【提示】利用植物组织培养技术可以大量、快速地培育兰花。兰花是观赏植物中最常见的一类,依靠植物组织培养繁育种苗的植物,其组培苗的数量约占观赏植物组培苗总量的40%。细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法,通过细胞器、细胞或组织水平上的操作,有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。原理和方法操作水平目的分类细胞生物学、分子生物学和发育生物学细胞器、细胞或组织获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品植物细胞工程和动物细胞工程植物组织培养植物细胞的全能性植物细胞工程常用方法、应用-培育杂种植株植物体细胞杂交技术细胞工程条件动物细胞培养步骤动物细胞工程常用方法、应用-制备单克隆抗体动物细胞融合应用动物体细胞核移植理论基础:受精和早期胚胎发育胚胎工程体外受精常用技术胚胎移植胚胎分割本章导图2.1 植物细胞工程(植物细胞工程的基本技术) 主备人:程蓓蓓第二章学习目标1.?植物细胞工程的理论基础是什么?2.什么是植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术?3.怎样进行菊花的组织培养?任务一:植物细胞全能性1.概念:细胞经过和分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能细胞内含有本物种的全部遗传信息。2.具有全能性的原因:芽原基只能发育为芽,叶原基只能发育为叶3.不体现全能性的实例:基因在特定时间和空间条件下会选择性表达原因:任务二:植物组织培养技术外植体1.概念: 指将 的植物器官、组织或细胞等,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其形成 的技术。、离体完整植株植物细胞的全能性2.原理: 细胞经分裂和分化后,仍然具有产生完整生物体或分化成其他各种细胞的潜能。任务二、植物组织培养技术3.过程:愈伤组织完整植株外植体芽、根等试管苗脱分化再分化生长 发育脱分化再分化接种外植体再分化移栽成活诱导生芽诱导生根诱导愈伤组织诱导愈伤组织的培养基 诱导生芽的培养基 诱导生根的培养基任务二、植物组织培养技术——菊花的组织培养愈伤组织:离体的植物器官、组织或细胞,在培养一段时间以后,通过细胞分裂,形成一种高度液泡化、无定形状态,具有分生能力的薄壁细胞。第一节方法步骤配制MS培养基外植体的选择与消毒外植体的接种愈伤组织培养(不需要光照)更换培养基生芽培养(每天光照12~16h)更换培养基生根培养移栽入土 探究·实践 菊花的组织培养一植物组织培养技术接下来我们通过“菊花的组织培养”实验来了解这一技术。阅读课本菊花的组织培养过程,讨论完成学案总结:脱分化和再分化对比 脱分化再分化过程结果需要的条件外植体→愈伤组织愈伤组织→幼苗形成根、芽形成愈伤组织a.离体b.适宜的营养c.生长素与细胞分裂素的比例适中d.一般不需要光照a.离体b.适宜的营养c.生长素与细胞分裂素的比例高或低诱导生根或生芽d.光照决定植物脱分化、再分化的关键因素注意: 实验中使用的培养基和所有器械都要灭菌。接种操作必须在酒精灯火焰旁进行,并且每次使用后的器械都要灭菌。 防止杂菌污染。因为杂菌生长快,会和培养物争夺营养。杂菌生长过程中会产生有害物质,导致培养物迅速死亡。为什么要强调所用器械的灭菌和实验人员的无菌操作?接种3~4d后,检查外植体的生长情况,统计有多少外植体被污染,试分析它们被污染的可能原因。培养基、接种工具灭菌不彻底;外植体消毒不彻底;操作过程不符合无菌操作要求等。被污染的培养基 植物组织培养瓶准备材料用具MS培养基 ( P116)植物组织培养常用的培养基:50mL锥形瓶(或植物组织培养瓶) 菊花的组织培养的步骤用酒精擦拭双手和超净工作台台面。①材料:幼嫩的菊花茎段②消毒:酒精无菌水无菌水次氯酸钠溶液30s30min2-3次2-3次①外植体消毒 菊花的组织培养的步骤说明:消毒酒精一般用体积分数70%的(医院一般用75%的)。次氯酸钠消毒的时间需要和浓度相匹配,并不固定。酒精和次氯酸钠消毒的机理有所区别,两者依次使用以达到更好的消毒效果。对外植体的消毒既要达到消毒的效果,又不能杀死外植体。①外植体消毒 菊花的组织培养的步骤将消过毒的外植体置于无菌培养皿中 用无菌滤纸吸去表面的水分用解剖刀将外植体切成0.5~1cm长的小段②外植体切段 菊花的组织培养的步骤在酒精灯火焰旁,将外植体的1/3~1/2插入诱导愈伤组织的培养基中用封口膜或瓶盖封盖瓶口,并在培养瓶上作好标记注意:接种时注意外植体的方向,不要倒插!③接种外植体(将形态学上端朝上,形态学下端朝下) 探 菊花的组织培养的步骤将接种了外植体的锥形瓶置于18-22℃的培养箱培中养脱分化
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