小细胞肺癌细胞系H446中癌干细胞及其转移亚群的研究的中期报告.docxVIP

小细胞肺癌细胞系H446中癌干细胞及其转移亚群的研究的中期报告 小细胞肺癌（SCLC）是一种高度恶性的肿瘤，常常出现远处转移，目前缺乏有效治疗手段。研究表明，SCLC中存在癌干细胞（CSCs），这些细胞具有自我更新和多向分化的能力，并在肿瘤的转移和复发过程中起到重要作用。因此，研究SCLC CSCs和其转移亚群具有重要意义。 本研究选取SCLC H446细胞系，通过肿瘤球形体（TSP）培养和流式细胞术分离方法，分离出H446 CSCs。通过Western blot和RT-PCR分析，发现H446 CSCs表达干细胞相关标志物CD133、CD44和Oct4等，同时抑制表达蛋白Bmi1和p21。体外增殖和侵袭实验证明，H446 CSCs具有增殖和侵袭的能力，且能够形成肿瘤球。 另外，通过细胞迁移实验证明，H446 CSCs具有较高的转移能力。RNA-seq分析结果显示，与H446非CSCs相比，H446 CSCs表达谷胱甘肽代谢相关基因、轴突生长相关因子等一系列与转移相关的基因。进一步地，通过筛选和排序单一细胞克隆形式建立了H446 CSCs的转移亚群，并筛选出具有更高转移能力的克隆。 综上所述，本研究成功分离出SCLC H446细胞系的CSCs，并证明这些细胞具有肿瘤球形体形成、增殖、侵袭和转移能力。通过RNA-seq和单细胞克隆筛选等方法，筛选出转移亚群，为研究SCLC转移提供了新的思路和方向。