利用转基因鼠研究基因Atoh1Math1介导的前庭毛细胞再生的中期报告.docxVIP

利用转基因鼠研究基因Atoh1Math1介导的前庭毛细胞再生的中期报告 本次研究旨在利用转基因技术构建Atoh1/Math1基因敲除和过表达的小鼠模型，探究Atoh1/Math1基因在前庭毛细胞再生中的作用机制。 实验设计： 1. 构建Atoh1/Math1基因敲除和过表达的小鼠模型。采用CRISPR/Cas9技术敲除Atoh1/Math1基因，并利用基因转染技术过表达Atoh1/Math1基因。 2. 研究Atoh1/Math1基因在前庭毛细胞再生中的作用机制。利用组织学、分子生物学等方法，观察Atoh1/Math1基因敲除和过表达对前庭毛细胞再生的影响。并通过分析上游、下游基因表达变化，探究Atoh1/Math1基因介导的前庭毛细胞再生的分子机制。 进展情况： 1. 成功构建了Atoh1/Math1基因敲除和过表达的小鼠模型。利用PCR和Western blot等方法成功鉴定出基因敲除和过表达的小鼠，为后续实验打下基础。 2. 观察了Atoh1/Math1基因敲除和过表达对前庭毛细胞再生的影响。组织学观察结果显示，敲除Atoh1/Math1基因的小鼠前庭毛细胞再生程度受到抑制；过表达Atoh1/Math1基因的小鼠前庭毛细胞再生程度明显增强。此外，通过分析上游、下游基因表达变化，初步发现Atoh1/Math1基因可能通过调控Notch信号通路、Fgf信号通路等途径介导前庭毛细胞再生。 下一步计划： 1. 进一步分析Atoh1/Math1基因介导的前庭毛细胞再生的分子机制。通过RNA-Seq等方法对敲除和过表达Atoh1/Math1基因的小鼠进行全转录组测序，分析差异基因、信号通路和功能模块等，并验证其在前庭毛细胞再生中的作用机制。 2. 探究Atoh1/Math1基因调控前庭毛细胞再生的功能机制。采用光遗传学等方法对Atoh1/Math1基因进行精细调控，检测前庭毛细胞再生的变化，探究Atoh1/Math1基因在前庭毛细胞再生中的具体作用机制。