农杆菌介导的小麦愈伤组织遗传转化及再生体系研究的中期报告.docxVIP

农杆菌介导的小麦愈伤组织遗传转化及再生体系研究的中期报告 本研究针对小麦愈伤组织的农杆菌介导遗传转化及再生体系进行了中期报告，以下是主要研究进展： 1. 筛选适宜愈伤组织诱导及增殖的基础培养基组合，经过多次尝试和优化，确定了以MS为基础配方，添加2 mg/L 2,4-D，0.5 mg/L KT，0.3%愈伤组织诱导透明质酸（Gelrite）为固态材料的愈伤组织基础培养基。 2. 收集小麦不同部位、不同生长阶段的组织，筛选出愈伤组织的来源组织，将其切成3-5 mm大小的愈伤组织，移入基础培养基进行愈伤组织诱导。 3. 进行农杆菌菌株的筛选和培养，将其转化质粒pBI121，其中含有GUS标记基因用于检测转化率。通过菌液处理愈伤组织培养物，进行遗传转化。 4. 通过对转化愈伤组织培养物进行G418筛选，筛选出抗性愈伤组织，再进行GUS染色，获得转化率。 5. 进行愈伤组织再生体系的建立，将转化愈伤组织移入含0.2 mg/L NAA和1 mg/L KT的愈伤组织成芽基础培养基，21天后形成愈伤芽，进一步移入无激素培养基进行生根和成苗。 初步结果显示，我们成功筛选到适宜小麦愈伤组织诱导和增殖的基础培养基组合，并成功进行农杆菌介导的遗传转化和再生体系的建立。目前正在对转化愈伤组织进行进一步鉴定和分析，同时优化再生体系流程，以提高转化率和再生率。