杂交粳稻b型性状与10个种质性状配合力的ssr分析.docxVIP

杂交粳稻b型性状与10个种质性状配合力的ssr分析 杂交水稻的总体质量比传统水稻好。这也是限制杂交水稻广泛种植的原因之一。优良品种的内在品质为水稻，均优于纯大米，外观品质为水稻，抗白粒率和抗白粒面积较大。对于杂种F1植株上所结的稻粒,稻壳、果皮和种皮三部分是由母体组织发育而来,仍属于F1代组织,籽粒间不发生遗传分离;胚和胚乳分别由受精卵和受精极核发育而来,已属于F2代,籽粒之间二倍体胚和三倍体胚乳均发生遗传分离。遗传研究证明,稻谷碾米品质(糙米率、精米率和整精米率)和精米外观品质(垩白米粒率、垩白面积和垩白度)受母株基因型控制,精米蒸煮食用品质(直链淀粉含量、胶稠度和糊化温度)则主要受胚乳基因型控制。控制稻米品质性状的遗传物质既有单位点的主效基因,也有多位点的微效基因,更多的是主效基因加微效多基因。基因的效应既有以加性为主的,也有加性-显性同样重要的,还有加性-显性-上位性都存在的。有的品质性状还受细胞质影响,有的受母体影响,还有的存在基因型与环境互作等等,因研究材料和方法而异。尽管稻米品质性状遗传机制复杂,且F2籽粒胚乳基因型发生1(AAA)∶3(AAa)∶3(Aaa)∶1(aaa)的分离(A和a表示不育系和恢复系同一位点两个不同等位基因),但由于是自交且商品米是一个混合群体,所以对杂交稻品质性状亲本配合力的分析和改良而言,按照二倍体性状来进行虽是别无选择却也是正确的。 迄今稻米品质性状配合力分析已有较多报道,利用分子标记辅助选择和转基因技术改良常规品种米质性状的报道也不少,但利用分子标记辅助选择改良杂交稻亲本品质性状的研究鲜有报道。本课题组2010年报道了杂交粳稻亲本产量性状优异配合力的标记基因型筛选结果,为亲本产量性状配合力的改良打下了基础。本研究测定NCII交配设计72个组合稻米品质性状,结合18个亲本SSR分子标记基因型数据,利用本课题组提出的优异配合力标记基因型鉴定方法,筛选了杂交粳稻亲本米质性状优异配合力的标记基因型,为下一步定向改良杂交粳稻亲本米质性状配合力提供标记信息。 1 材料和方法 1.1 冀县县以及恢复系 供试材料为印度春籼Boro II细胞质的6个粳稻不育系与12个粳稻恢复系按NCII交配设计配制的72个F1组合收获晒干后、室内放置3个月的稻谷。6个粳稻不育系分别是武3A、863A、6427A、9522A、六千辛A、武羌A。12个粳稻恢复系分别为3726R-21、武育粳R-39、6427R-16、157TR-68、4016LHR-69、秀水04R、C418、77302-1、C堡、R254、湘晴、宁恢8号。这些不育系和恢复系都是遗传育种研究上和生产上常用的骨干亲本。 1.2 种植及数据处理 72个组合的配制是2007年正季在南京和冬季在海南完成的。2008年正季在南京农业大学江浦试验站种植18个亲本和72个组合的F1。5月10日播种,6月13日移栽。每小区种植4行,每行8穴,每穴1株。株行距为17 cm×20 cm。完全随机区组排列,3次重复。栽培管理同大田。成熟后各小区去边行收获。将稻谷晒干后于室内放置3个月用于米质分析。米质分析的性状有10个,即谷粒长、谷粒宽、糙米率、精米率、整精米率、垩白米粒率、垩白度、糊化温度、胶稠度和直链淀粉含量。用游标卡尺测量谷粒长和谷粒宽。每份材料每个重复随机测定30粒,精确到0.02 mm。按照文献和规定的方法测定糙米率、精米率、整精米率、垩白米粒率、垩白度、糊化温度、胶稠度和直链淀粉含量。 1.3 通过提取dna和pcr扩增和扩增产物 1.3.1 提取的dna 分蘖期剪取12份恢复系和6份不育系的叶片,按照文献和所述的SDS法提取总DNA。 1.3.2 ssr-pcr反应 -1模板DNA 1μL、25 mmol L-1Mg Cl20.6μL、2 pmolμL-1前引物0.7μL、2 pmolμL-1后引物0.7μL、2.5 mmol L-1d NTP 0.2μL、10×SSR缓冲液1μL和5 UμL-1Taq DNA聚合酶0.1μL,双蒸水5.7μL。扩增反应在PTC-100 Peltier Thermal Cycler(MJ Research Inc.,USA)上进行。PCR程序为95℃预变性5 min;95℃30 s,55℃30 s,72℃1 min,35个循环;最后72℃延伸7 min。 1.3.3 agno3凝胶渗透 扩增产物经8.0%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后,用含有10%乙醇和0.5%冰乙酸的固定液固定凝胶12 min;再以0.2%Ag NO3溶液渗透12 min;用dd H2O清洗2次,每次15 s;最后用含15 g L-1Na OH的1%甲醛溶液显色,待条带清晰时取出放在灯箱上,根据带型及DNA分子量标记,记录每个扩增片段的碱基数。 1.4 数据分析