dFGEN对谷氨酸诱导的PC12细胞损伤的保护作用研究的中期报告.docxVIP

dFGEN对谷氨酸诱导的PC12细胞损伤的保护作用研究的中期报告 中期报告： 一、项目背景 谷氨酸是一种重要的兴奋性神经递质，但在高浓度下，谷氨酸能引起细胞凋亡和坏死。PC12细胞是大量用于神经保护作用研究的模型细胞系。以前的研究表明，dFGEN对PC12细胞损伤和其他神经细胞类型具有神经保护作用。本研究旨在探究dFGEN是否能够保护PC12细胞免受谷氨酸诱导的细胞损伤，并阐明其作用机制。 二、实验方法 在本研究中采用以下实验方法： 1. PC12细胞培养及鉴定：PC12细胞以对氨基苯甲酸钠（NGF）为刺激因子，培养于高糖（4.5 g/L) DMEM 培养基中。通过检测突触素S100的表达计算出PC12细胞的细胞增殖率。 2. 细胞模型制备：PC12细胞分别进行对照组、谷氨酸模型组和不同浓度 dFGEN 的干预组。谷氨酸模型组细胞培养基中加入50 mM呋嘧唑酸（FM）和20 mM谷氨酸，使细胞受到80分钟的谷氨酸诱导。干预组培养基分别加入dFGEN，浓度分别为50、100、200、500 μmol/L，24小时后记录细胞形态。 3. 细胞活力检测：采用MTT实验检测dFGEN对谷氨酸模型组细胞的活力。 4. 细胞凋亡检测：流式细胞术检测干预组细胞凋亡率，RT-PCR检测凋亡相关基因的表达。 5. 细胞ROS生成检测：荧光素二酸（DCFH-DA）法检测细胞ROS生成。 三、预期结果 预计通过本研究可以检测到不同浓度dFGEN对谷氨酸模型组细胞的保护作用，明确dFGEN的作用机制，强化dFGEN作为神经保护剂的潜力。