斜纹夜蛾普通气味结合蛋白的基因克隆和原核表达的开题报告.docxVIP

斜纹夜蛾普通气味结合蛋白的基因克隆和原核表达的开题报告 题目：斜纹夜蛾普通气味结合蛋白的基因克隆和原核表达的研究 背景介绍： 斜纹夜蛾（Spodoptera litura）是一种重要的农业有害昆虫，在旱区及半旱区发生较为常见，对多种作物造成严重危害。作为昆虫的化感器官之一，感觉触角主要负责昆虫的味觉和嗅觉能力。普通气味结合蛋白（general odorant binding protein，GOBP）是感觉触角中重要的嗅觉蛋白，它能够特异性地结合外源性小分子化合物，从而对昆虫的嗅觉行为起到重要的作用。 研究目的： 本研究旨在从斜纹夜蛾感觉触角中克隆普通气味结合蛋白基因，进而在原核表达系统中对其进行表达和纯化，为后续进一步研究斜纹夜蛾嗅觉诱导机制奠定基础。 主要研究内容： 1.设计并合成斜纹夜蛾普通气味结合蛋白基因的引物； 2.从斜纹夜蛾感觉触角组织中提取总RNA，用逆转录酶聚合酶链式反应（RT-PCR）技术扩增GOBP基因； 3.将扩增出来的GOBP基因克隆到载体中，构建原核表达载体； 4.在大肠杆菌中进行GOBP重组蛋白的原核表达，并纯化其目标蛋白； 5.进行纯化后的GOBP蛋白的相关性质分析，包括孪生光波分析、荧光探针探测、小分子化合物亲和力测定等。 研究意义： 本研究可以为进一步研究斜纹夜蛾的嗅觉感知、嗅觉诱导以及相关嗅觉信号转导机制等提供新的思路，并为研究斜纹夜蛾的防治技术提供新的启示和帮助。此外，本研究设计的基因克隆和表达方案也可以为其他嗅觉蛋白的克隆和表达提供参考。