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中断杂交作图:指在Hfr×F-杂交中,把接合中的细菌在不同时间取样,搅拌中断杂交,分析受体菌基因型,以Hfr基因出现在F-中的先后顺序,以转移时间为图距单位进行基因作图的方法本文档共74页;当前第30页;编辑于星期六\11点30分用一种大肠杆菌的不同Hfr菌株进行中断杂交实验,作出连锁图,其基因向F-细胞转移的顺序不同转移的顺序是不是随机的?比如:thrthigly本文档共74页;当前第31页;编辑于星期六\11点30分本文档共74页;当前第32页;编辑于星期六\11点30分本文档共74页;当前第33页;编辑于星期六\11点30分大肠杆菌K12菌株部分遗传图,整个环状基因组约100min本文档共74页;当前第34页;编辑于星期六\11点30分重组作图两基因转移时间间距小于2min时,中断杂交法的图距不够精确,应采用重组值测定Hfr(lac+ade+strs)×F-(lac-ade-strr)已知ade+在lac+之后进入F-将两型细菌混合互作60min,在含str无ade的选择培养基上筛选ade+菌株,菌落克隆影印至伊红美蓝培养基确定其乳糖基因型,计算lac与ade的重组值例:两个紧密连锁基因:lac-(乳糖不发酵)ade-(腺嘌呤缺陷型)本文档共74页;当前第35页;编辑于星期六\11点30分粉红色菌落:lac-紫红色菌落:lac+本文档共74页;当前第36页;编辑于星期六\11点30分5215Rf(ade-lac)=lac-ade+lac-ade++lac+ade+=1515+52×100%=22%1min大约相当于20%重组值大肠杆菌染色体全长100min,约2000cM,1cM=2000bp本文档共74页;当前第37页;编辑于星期六\11点30分F′:Hfr菌株的F因子不正常环出,可能会包含部分细菌的染色体片段,称为F′因子本文档共74页;当前第38页;编辑于星期六\11点30分F′×F-能使F-变成F′,细菌的遗传重组频率很高HfrF′性导(sexduction):利用F′因子将供体细胞基因导入受体形成部分二倍体的过程称为性导本文档共74页;当前第39页;编辑于星期六\11点30分F-菌株:缺乏F因子F+菌株:具有游离的F因子Hfr菌株:F因子整合到宿主染色体上F′菌株:含带有部分宿主染色体的游离F因子三种致育因子的关系F+×F-:能使F-变成F+,细菌的遗传重组频率很低Hfr×F-:不能使F-变成F+,细菌的遗传重组频率很高F′×F-:能使F-变成F′,所携带细菌基因的遗传重组频率很高本文档共74页;当前第40页;编辑于星期六\11点30分本文档共74页;当前第41页;编辑于星期六\11点30分烈性噬菌体(virulentphage)侵入宿主细胞后,利用宿主细胞内的物质进行自身遗传物质和蛋白质的合成,组装出子噬菌体,使宿主细胞裂解而释放子噬菌体,这类噬菌体称为烈性噬菌体。T系列噬菌体第三节噬菌体的遗传分析本文档共74页;当前第42页;编辑于星期六\11点30分烈性噬菌体侵染过程本文档共74页;当前第43页;编辑于星期六\11点30分温和噬菌体(temperatephage):侵入后并不使细菌裂解,而是以原噬菌体或质粒的形式存在的一类噬菌体称为温和性噬菌体。λP1噬菌体温和噬菌体侵染宿主菌后仅有少数基因活动,表达出阻遏物关闭其它基因从而使该噬菌体不具有感染能力。这种无感染能力的噬菌体称为原噬菌体(prophage)原噬菌体经诱导可转变为烈性噬菌体溶源菌:含有温和噬菌体的寄主细菌称为溶源菌溶源免疫:含有原噬菌体的细菌具有抵抗同种噬菌体超感染的能力,称为溶源免疫本文档共74页;当前第44页;编辑于星期六\11点30分本文档共74页;当前第45页;编辑于星期六\11点30分本文档共74页;当前第46页;编辑于星期六\11点30分温和噬菌体的溶菌周期和溶源周期本文档共74页;当前第47页;编辑于星期六\11点30分合子诱导(zygoticinduction)雅可布和沃尔曼(1956年)发现了合子诱导现象。含有原噬菌体(λ)的Hfr×F-很难得到重组子,而Hfr×F-(λ)或Hfr(λ)×F-(λ)却可以得到重组子。这是由于在Hfr(λ)×F-的杂交中,原噬菌体进入无阻遏物的受体细胞质中进行大量复制使受体细胞裂解,因此不易得到重组子,此现象就称为合子诱导。利用合子诱导可以确定噬菌体在细菌染色体上的整合位点Hfr(λ)×F-无重组子Hfr×F-(λ)有重组子Hfr(λ)×F-(λ)有重组子本文档共74页;当前第48页;编
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