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Ⅵ，、Ⅳw．chinadairy．net中国乳品工业

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测序技术的研究进展及三代测序的应用

乌日拉嘎，徐海燕，冯淑贞，孙志宏，孟和毕力格，张和平

(内蒙古农业大学乳品生物技术与工程教育部重点实验室，呼和浩特010018)

摘要：简述了一代和高通量测序技术的基础上重点介绍以单分子实时测序为代表的第三代测序技术及其他的应用，并对单分子测

序技术和未来发展方向进行展望。

关键词：Sanger~|序技术；高通量测序技术；单分子测序技术；应用

中图分类号：Q503文献标识码：B文章编号：1001—2230{2016)04—0033—05

Researchprogressofsequencingtechnologiesandtheapplicationofthirdgener-

ationsequencing

WurilagaXUHai—yan，FENGShu—zhen，SUNZhi—hong，Menghebilige，ZHANGHe—ping

rKeyLaboratoryofDairyBiotechnologyandEngineeringMinistryofEducationministryInnerMongoliaAgricultural

University，Huhhot010018，China)

Abstract：Thispaperreviewsthefirstgenerationandhigh——throughputsequencingtechnologiesbrieflyandthenemphaticallydescribesthe

applicationofthethirdgenerationsequencingtechnologies(Single—moleculereal—timesequencingtechnologies，SMRT)．Thenthefuture

developmentdirectionofsingle—moleculesequencingtechnologywaspredicted．

Keywords：thefirstDNAsequencing；high——throughputsequencing；single——moleculesequencing；application

0引言1第一代测序技术

1944年Avery通过肺炎双球菌转化实验证明了DNA测序技术在分子生物学领域中的作用不言

DNA是遗传信息的载体n1。之后，人们便开始致力于研而喻，并且推动了生物学的发展。1977年，Sanger发

究DNA的结构与序列，使得DNA测序技术应运而明的DNA双脱氧核苷酸末端终止测序法(chainter—

生。随之，1953年T．D．Watson和F．H．C．Crick发现的minatorsequencing)和A．M．Maxam和W．Gflbe~报道

DNA双螺旋模型推进了DNA测序技术的迅猛发展2[1。的DNA化学降解测序法(chemicaldegradationse—

关于DNA测序技术的较早报道始于1954年Whitfeldquencing)为代表的第一代测序技术诞生，但由于化

等用化学降解法测定了多聚核糖核苷酸序列嘲。成熟学讲解法的程序复杂，后来逐渐被Sanger测序法代

的DNA测序技术始于20世纪7O年代中期，由Sanger替。Sanger测序法的原理是由于双脱氧核苷三磷酸

的链末端终止法州和Maxam与Gflbe~的化学裂解法(ddNTP)的2、3位置不含羟基，在DNA合成反应中不

到Roche公司的454技术、Illumina公