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人工老化对芝麻种子生理生化的影响

芝麻是中国四大石油资源之一，是重要的原材料产区。我国拥有芝麻种质资源5000余份,是世界芝麻资源保存数量最多的国家之一。芝麻种子内含有大量的脂肪,通透性差,易吸湿返潮、发热霉变、贮藏稳定性差,易发生种子老化现象。这种现象不但影响芝麻种子萌发、幼苗生长及后期种子的产量与品质,而且对种质资源的保存、开发和利用等产生严重的影响。种子活力是评价种子质量的一项重要指标,活力测定方法的研究一直为种子工作者所重视与关注。

人工加速老化的方法能在较短的时间内获得不同活力的种子,为种子活力测定方法的研究提供材料基础。我国学者对(58±1)℃人工加速老化处理后种子生理生化变化进行研究发现,种子老化及劣变是一个非常复杂的过程,涉及到膜结构和功能的变化,基本代谢的变化等。Thant等研究表明,芝麻人工老化最适处理条件是42~43℃、100%RH处理120h。对于不同类型的芝麻品种,由于其本身的化学成分不同,影响种子活力的构成因素也不同,因此,有必要针对不同类型芝麻种子采用不同的活力检测方法。然而,目前尚未见到在最适人工老化处理温度下,对不同类型芝麻种子活力测定适宜的报道。因此,本研究采用标准发芽试验、电导率测定、TTC定量测定、丙二醛含量和POD活性测定等方法对人工老化获得的4种类型芝麻种子进行测定,研究人工老化处理对芝麻种子生理生化的影响,并与模拟田间出苗率进行相关分析,以确定不同类型芝麻种子活力检测的适宜指标和方法,为芝麻种子的保存和定时更新繁殖提供参考依据。

1材料和方法

1.1协商型-枝型

供试材料为白芝麻舆芝2018(单秆型)、临颍王孟白芝麻(分枝型)、黑芝麻湖北独角黄(单秆型)和湖北应山黑芝麻(分枝型),由河南省芝麻研究中心提供。

1.2测试方法

1.2.1不同浓度下配方

参照Thant等人工老化处理方法,在高温(42~43℃),高湿(100%RH)密闭环境下,分别处理24,48,72,96,120h。具体方法:将干燥器下部装水,放入恒温培养箱内,调节箱内温度,平衡48h后,使干燥器内温度、湿度恒定,此时将种子装入尼龙袋,放入干燥器内进行处理。处理完毕后,置于室内阴凉处风干备用。以未经老化处理的种子为对照(CK)。

1.2.2种子萌发率调查

参照《国际种子检验规程》中的发芽条件进行发芽试验,将处理种子和未处理种子(CK)均匀置于铺有2层滤纸的培养皿内,每皿50粒,重复3次,在25℃,湿度85%,光照16h,黑暗8h的恒温培养箱内进行发芽。以胚根突破种皮后长度达到与种子等长、胚芽达到种子长度50%时记为发芽。按照农作物种子检验规程GB/T3543.4-1995,每天调查记录每皿种子发芽数,发芽势和发芽率分别为3,7d发芽的百分率。发芽指数、活力指数计算如下:

发芽指数:GI=∑(Gt/Dt),Gt:第t天的发芽率;Dt:发芽天数;

活力指数:VI=GI×S,S为10株鲜样质量的平均值。

1.2.3丙二醛含量测定

电导率测定参照Hong等的方法;脱氢酶活性测定参照胡晋TTC改进法;丙二醛(MDA)含量测定采用黄学林等双组分分光光度计法;过氧化物酶(POD)活性采用愈创木酚法测定。

1.2.4种子出芽率对作物生长发育的影响

种子在人工气候培养箱和室外自然环境之间存在一定差异,所以模拟田间自然环境,观察种子出芽率对作物生长发育是必要的。取水分适宜的大田土壤用孔径为2.0mm的筛子去除杂质,然后放置于培养盒内,每品种随机选取100粒完整、饱满种子播于土壤中,均匀覆土约1.5~2.0cm厚,3次重复,室温下第7天统计出苗率。

2结果与分析

2.1不同品种、不同发芽率和活力指数的变化

人工老化处理后,不同类型芝麻种子发芽情况和种子活力如表1所示。从表1可以看出,随老化时间的延长,各类型芝麻种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数均呈下降趋势,但不同基因型材料的变化趋势存在明显差异。湖北应山黑芝麻的活力指数在老化处理24h极显著低于CK,发芽势、发芽率和发芽指数在处理48h时极显著低于CK;湖北独角黄的发芽指数和活力指数在老化处理48h极显著低于CK,发芽率在老化处理72h极显著低于CK;而临颍王孟白芝麻和舆芝2018的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数老化处理96h时才极显著低于CK。经过120h的人工加速老化处理后,临颍王孟白芝麻的发芽率降幅最大,为82.9%,其次为舆芝2018和湖北独角黄,降幅分别为76.3%和69.7%,下降幅度最小的是湖北应山黑芝麻,为35.0%。可见,白粒芝麻比