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菜心几丁质结合蛋白的分离纯化及特性研究的开题报告
一、研究背景和意义
几丁质是一种生物可降解的天然高分子化合物,具有广泛的应用价值,如用于水处理、制备生物材料和药物控释等。其中,菜心中的几丁质是一种常见的来源。而几丁质结合蛋白是一种与几丁质紧密结合的蛋白质,在生物学和医药领域也具有重要的应用价值。因此,研究菜心中几丁质结合蛋白的分离纯化及特性,对于深入了解几丁质结合蛋白的生物学功能和推动其应用具有重要的意义。
二、研究内容和方法
1.研究内容
本研究旨在开展菜心中几丁质结合蛋白的分离纯化及特性研究,具体研究内容包括:
(1)制备含有菜心中的几丁质结合蛋白的提取物。
(2)采用离子交换层析、凝胶过滤层析和亲和层析等多种层析方法对提取物进行分离纯化。
(3)对分离纯化后的蛋白质进行SDS和Westernblotting等电泳和免疫学方法进行鉴定。
(4)测定分离纯化后蛋白质的理化性质和抗氧化性能。
2.研究方法
本研究采用多种方法对含有菜心中的几丁质结合蛋白的提取物进行分离纯化:
(1)离子交换层析:使用DEAE-52离子交换树脂进行离子交换层析,分离目标产物。
(2)凝胶过滤层析:采用SephadexG-75凝胶过滤层析,进一步分离目标产物。
(3)亲和层析:利用几丁质的亲和性,采用几丁寡糖固相层析柱对目标产物进行纯化。
三、研究预期结果
预期结果如下:
(1)制备含有菜心中的几丁质结合蛋白的提取物;
(2)成功分离纯化几丁质结合蛋白;
(3)鉴定分离纯化后的蛋白质的分子量和纯度;
(4)测定分离纯化后蛋白质的理化性质和抗氧化性能。
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